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    39. 【生物—生物技术实践】（本题共15分）

    多聚半乳糖醛酸酶（PG）能降解果胶使细胞壁破损。番茄果实成熟中，PG合成显著增加，能使果实变红变软，但不利于保鲜。利用基因工程的方法减少PG基因的表达，可延长果实保质期。科学家将PG基因反向接到Ti质粒上，导入到番茄细胞中，得到转基因番茄。请据图22 回答：

        图22

    （1）（每空2分）提取目的基因

      ①若已获取PG的mRNA，可通过                 获取PG基因。

    ②在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，结构A上应具有         结合位点。得到的目的基因两侧需人工合成BamHI黏性末端。已知BamHI的识别序列如图23-甲所示，请在图23-乙相应位置上，画出目的基因两侧的黏性末端。

    ③重组质粒转化到大肠杆菌中的目的是                                。

    （2）用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有           的培养基进行筛选，与此同时，为能更好地达到培养目的，还需在培养基中加入                       。培养24～48h后取样，在质量分数为25%的蔗糖溶液中，观察细胞                   现象来鉴别细胞壁是否再生。

    （3）由于导入的目的基因能转录反义RNA，且能与                         互补结合，抑制PG基因的正常表达。若转基因番茄的保质期比非转基因番茄        ，则可确定转基因番茄成功。

    （4）获得的转基因番茄产生的种子不一定保留目的基因，科研人员常采用      方法使子代保持转基因的优良性状。（2分）

    【答案】（1）（每空2分）（1）①逆转录（或cDNA文库）②RNA聚合酶   

    ③大量复制目的基因（克隆目的基因）

    （2）卡那霉素 ；植物激素（生长素和细胞分裂素）是否发生质壁分离

    （3）天然PG基因转录的mRNA ；长

    （4）（2分）植物组织培养

    【解析】已获取了PG的mRNA，可通过逆转录获取PG基因。在该基因上游加结构A可确保基因的反向转录，则结构A上应具有RNA聚合酶的结合位点。图23-甲所示为BamHI的识别序列，切割后得到的末端为。重组质粒转化到大肠杆菌中能大量复制目的基因（克隆目的基因）。用含目的基因的农杆菌感染番茄原生质体后，可用含有卡那霉素的培养基进行筛选，同时培养基中加入植物激素（生长素和细胞分裂素），以促进生长。导入的目的基因能转录反义RNA可以与天然PG基因转录的mRNA互补结合，从而抑制PG基因的正常表达，使转基因番茄的保质期延长。由于有性生殖可以发生性状分离现象，因此采用植物组织培养的方法可以避免此种情况的发生。

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    科目：高中生物 来源：2010年辽宁省丹东市四校协作体高三上学期第一次联合考试（理综）生物 题型：综合题

    【生物——选修l生物技术实践】（15分）
    去年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。
    （1）有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，用这种方法提取橘皮精油的主要步骤是：石灰水浸泡、漂洗、        、         、静置、            。
    （2）橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料______和有效成分_______等问题。
    （3）在提取橘皮精油时，橘皮在石灰水中的浸泡时间为     以上，并且橘皮要浸透，这样最后才会得到高的出油率。
    （4）从橘皮中提取的橘皮精油的特点是      ，具有诱人的橘香味。
    （5）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，在组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有_______法，某些植物的花粉不易着色，需采用_______法。
    （6）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有_______和_______。这两种激素的浓度配比。请解释橘树上的细胞不离体便不能长成完整植株的根本原因：
                                                               。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【生物——选修l生物技术实践】

    去年我国某地由于柑橘大实蝇的危害，橘农遭受到了很大的损失，当地政府想尽一切办法帮助橘农尽量减少损失。

       （1）有人想提取橘皮精油获取利润，一般提取橘皮精油的方法是_______法，用这种方法提取橘皮精油的主要步骤是：石灰水浸泡、漂洗、         、          、静置、             。

       （2）橘皮精油的提取之所以不采取水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料______和有效成分_______等问题。

       （3）在提取橘皮精油时，橘皮在石灰水中的浸泡时间为      以上，并且橘皮要浸透，这样最后才会得到高的出油率。

       （4）从橘皮中提取的橘皮精油的特点是       ，具有诱人的橘香味。

       （5）某橘农发现自家有一株橘树具有抗虫性状，欲利用组织培养技术大量繁殖，在组织培养的选材非常关键，植物材料的选择直接关系到实验的成败。若用花药进行离体培养则应选择花粉发育至_______期的花药培养成功率最高。确定花粉发育时期最常用的方法有_______法，某些植物的花粉不易着色，需采用_______法。

       （6）影响植物组织培养的因素很多，其中最关键的激素有_______和_______。这两种激素的浓度配比。请解释橘树上的细胞不离体便不能长成完整植株的根本原因：

                                                                       。

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