Question

【题目】乙肝病毒是一种DNA病毒。中国的乙肝病毒携带者约占总人口的10%。我国科学家通过基因工程生产出乙型肝炎病毒疫苗，为预防乙肝提供了有力的保障。请回答下列问题：

（1）乙肝病毒专一侵染肝细胞的原因是______________________________________。

（2）通过基因工程生产乙肝疫苗的过程如图所示：

乙肝病毒有关基因细菌大量生产疫苗

a．若要获得大量的目的基因，可采用PCR技术进行体外扩增，该技术中使用的需要的酶是____________酶，引物有________种。

b．在①②过程中需使用的工具酶是________________。②过程中常用的载体是________。

c．为提高②过程的转化效率，常采用的方法是________________________。

（3）使用酵母菌作为受体菌生产乙肝疫苗的效果更好，从细胞结构的角度分析，原因是________________________________________________________________________。

Answer 1

【答案】肝细胞表面有乙肝病毒的受体 Taq酶（热稳定DNA聚合酶） 2 限制酶和DNA连接酶 质粒 用Ca2＋溶液处理细菌 酵母菌具有内质网、高尔基体，可以对核糖体合成的肽链进行剪切、折叠、加工、修饰等处理

【解析】

基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）肝细胞表面有乙肝病毒的受体，因此乙肝病毒专一侵染肝细胞。
（2）a、PCR技术可体外大量扩增目的基因，该技术的条件之一是需要2种引物，其作用是使DNA聚合酶能够从引物的结合端开始连接脱氧核苷酸，同时需要热稳定DNA聚合酶的催化。
b、图中①表示获取目的基因的过程，该过程需要限制酶，②包括基因表达载体的构建过程，而构建基因表达载体时需要限制酶和DNA连接酶，同时该过程中常以质粒作为载体。c将目的基因导入微生物细胞常用感受态转化法，即用Ca2+（CaCl2）溶液处理细菌，使之成为易于吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。
（3）使用酵母菌作为受体菌生产乙肝疫苗的效果更好，从细胞结构的角度分析，原因是酵母菌是真核生物，具有内质网、高尔基体，可以对核糖体合成的肽链进行剪切、折叠、加工、修饰等处理。