Question

【题目】下图表示基因工程中构建生产人乳铁蛋白的重组载体。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用几种限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因?筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含哪种抗生素的培养基上进行?(　　)

A. 1种　四环素

B. 2种　氨苄青霉素

C. 1种　氨苄青霉素

D. 2种　四环素

Answer 1

【答案】B

【解析】外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位点，其中限制酶SmaI的切割位点位于目的基因上，所以获取目的基因和构建基因表达载体时，应用HindⅢ和BamHⅠ2种限制酶。用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割质粒后，会破坏质粒上的四环素抗性基因tetR，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因ampR，因此筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含氨苄青霉素的培养基上进行。因此，B项正确，A、C、D项错误。