Question

43.（10分）已知细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能破氨基嘌呤阻断。人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S途径，但能不断分裂增殖，将这两种细胞在试管中混合，促融获得杂种细胞。请回答：

（1）试管中加入这两种细胞后，还要加入诱导剂，除融合的杂种细胞外，还有__________种融合细胞，细胞融合所依据的原理是__________。

（2）设计一方法（不考虑机械方法），从培养液中分离出杂种细胞，并说明原理：

方法：在培养液中加入__________，培养后收集增殖细胞。

原理：培养液中加入该物质后，下列细胞中，不能生长的细胞有__________（写序号），不能生长的原因是__________，有的细胞能生长，原因是__________。

①骨髓瘤细胞  ②融合的淋巴细胞  ③杂种细胞  ④融合的骨髓瘤细胞  ⑤淋巴细胞

（3）培养分离出的杂种细胞，培养液中除了有糖、氨基酸、水、无机盐、微量元素、促生长因子外，还必须添加__________，同时还应控制好培养液的温度、__________（至少写两点）等外界环境条件。若出现细胞的接触抑制时，应用__________处理后分瓶培养。

（4）将分离出的杂种细胞在不同条件下继续培养，获得A、B、C三细胞株。各细胞株内含有的人染色体如表（“+”有，“-”无），测定各细胞株中人体所具有的五种酶的活性。结果是：①B株有a酶活性：②A、B、C株均有b酶活性；③A、B株有c酶活性；④C株有d酶活性；⑤A、B、C株均无e酶活性。若人基因的作用不受鼠基因的影响，则支配a、b、c、d和e酶合成的基因依次位于人的第__________号染色体上。

细胞株	人染色体编号
	1	2	3	4	5	6	7	8
A株	+	+	+	+	-	-	-	-
B株	+	+	-	-	+	+	-	-
C株	+	-	+	-	+	-	+	-

Answer 1

43. （1）2  细胞膜的流动性

    （2）氨基嘌呤   ①②④⑤    加入氨基嘌呤后，使D合成途径阻断，仅有D全合成途径的骨髓细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，淋巴细胞一般不分裂增殖

    人淋巴细胞和骨髓癌细胞融合后的杂种细胞中可以利用淋巴细胞中的S途径合成DNA而增殖。

    （3）动物血清    PH、渗透压、溶解氧    胰蛋白酶

    （4）6、1、2、7、8