Question

19．1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功．如右图，请据图回答问题．
（1）此图表示的是采取人工合成目的基因的方法获取胰岛素基因的过程．图中DNA是以胰岛素mRNA为模板，逆转录形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要胰岛素基因．
（2）图中②代表的是限制性核酸内切酶，在它的作用下将质粒切出黏性末端．再以DNA连接酶连接形成重组质粒，重组质粒中除了胰岛素基因以外，还必须含有启动子，终止子和标记基因，这样才能构成一个完整的基因表达载体．
（3）图中④表示的过程是重组DNA导入受体细胞．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：①是以mRNA为模板逆转录形成DNA；②用限制酶切割质粒；③表示构建重组质粒；④是将重组质粒导入受体细胞；⑤过程表示重组质粒随着大肠杆菌的复制而复制，据此答题．

解答 解：（1）分析图解可知，图中通过反转录法合成目的基因，即表示采取人工合成方法获取原胰岛素目的基因的过程．因此，图中DNA是以胰岛素mRNA为模板，逆转录形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要胰岛素基因．
（2）图中②代表的是限制性核酸内切酶，在它的作用下将质粒切出黏性末端．再以DNA连接酶连接形成重组质粒，重组质粒中除了胰岛素基因以外，还必须含有启动子，终止子和标记基因，这样才能构成一个完整的基因表达载体．
（3）图中④表示重组DNA即目的基因导入受体细胞，一般需将大肠杆菌用氯化钙处理，以增大其细胞壁的通透性，使得细胞成为感受态细胞．
故答案为：
（1）胰岛素mRNA   逆转录  胰岛素基因
（2）限制性核酸内切    黏性    DNA连接    标记基因   基因表达载体
（3）重组DNA（目的基因）导入受体细胞

点评 本题考查了基因工程的原理和操作步骤等相关知识，要求考生能够识记基因工程的操作工具和步骤，根据图解分析确定目的基因获取的方法，难度不大．