Question

1．在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图．有关叙述错误的是（　　）

• A． 接种前应对培养基进行髙压蒸汽灭菌
• B． 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
• C． 接种过程中至少需要对接种环灼烧5次
• D． 甲中a区域为划线的起始位置

Answer 1

分析 平板划线的操作的基本步骤是：
（一）、右手持接种环，经火焰灭菌，待凉后，在火焰旁打开盛有菌液的试管棉塞，并将试管口过火焰，将以冷却的接种环伸入菌液，沾取一环菌液，将试管口过火焰丙塞上棉塞．
（二）、左手斜持琼脂平板，皿盖打开一条缝，右手于火焰近处將接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖，接种环不应划破培养基表面．
（三）、烧灼接种环，杀灭环上残留菌液，待冷却（是否冷却，可先在培养基边缘处试触，若琼脂溶化，表示未凉，稍等再试），从第一区域划线的末端开始往第二区内划线，重复以上操作，在第三四五区内划线，注意不要将最后一区的划线与第一区相连．
（四）、将平板倒置，放入培养箱中培养．

解答 解：A、培养基一般用髙压蒸汽灭菌，A正确；
B、菌液经过连续划线，菌液中的菌体越来越少，最后容易形成单菌落，B正确；
C、在每次划线前后都要对接种环进行灭菌，因此按照图中划线顺序（d→c→b→a），整个划线过程中需要对接种环进行灼烧的次数为5次，C正确；
D、每次划线的菌种来自上一区域的末端，因此划线的起始区域菌落更多，由图乙可知，甲中d区域菌落多，为划线的起始位置，D错误．
故选：D．

点评 本题主要考查平板划线法的操作步骤及摘要事项，意在提高学生实验中无菌操作意识和相关实验技能．