叶肉细胞原生质体分离和培养的主要过程可以用下图解简单表示:
(1)图解中“酶解”所用的酶应该包括_______和_______。
(2)原生质体的结构由__________________三部分组成。
(3)DPD培养基成分中,除了各种营养成分外,还必须含有____________、____________才能获得愈伤组织。
(4)获得原生质体后,需要对其活力进行检查,下列哪种实验最适合( )
A、观察原生质体的结构是否完整 B、观察细胞质流动
C、观察细胞的有丝分裂 D、观察叶绿体数目的多少
(5)一般在培养基上培养24-48小时后,大部分原生质体已再生出细胞壁,可以取样,利用25%蔗糖溶液以及其它用具,通过____________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
科目:高中生物 来源:2011-2012学年广东省汕头金山中学高二月考生物试卷(带解析) 题型:综合题
(18分).植物叶肉细胞原生质体的分离和培养的主要过程可用下图所示图解简单表示:
(1)科学家所用的这种生物技术叫做______________________。该技术表明,当植物细胞处于离体状态时,在一定的营养物质、___________(至少回答2种)等植物激素和其他外界条件的作用下,可能表现出___________,发育成完整植株。
(2)图中“酶解”所用的酶应该包括___________和___________。
(3)原生质体的结构包括________________三部分构成。
(4)图中c过程称为___________。通过c过程产生的愈伤组织细胞与根韧皮部细胞形态结构___________(相同/不同),其根本原因是______________________。
(5)一般在培养基上培养24~48小时后,大部分原生质体已再分
生出细胞壁。可以取样,利用25%的蔗糖溶液以及其他用具,通过______________________实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(6)某课外小组同学用愈伤组织同时进行了两组实验:甲组培养基中含3%的蔗糖,乙组培养基中不含蔗糖,经灭菌后接种,每组实验再分成两个小组,分别在光下和暗处培养。1个月后,观察植物体生长、分化情况,结果如下表:
培养条件 | 甲组 | 乙组 |
光下 | 正常生长,分化 | 不生长,死亡 |
暗处 | 正常生长,不分化 | 不生长,死亡 |
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科目:高中生物 来源:2014届湖南师大附中高三第三次月考生物卷(解析版) 题型:综合题
[生物——选修现代生物科技专题](15分)
植物叶肉细胞原生质体分离和培养的主要过程可用下面的图解简单表示。
(l)图中“酶解”所用的酶应该包括 、 。
(2)原生质体的结构包括 、 、 三部分。
(3)用于植物组织培养的培养基中除了含有一定的营养外,还必须含有 、 等植物激素。
(4)一般在培养基上培养24~48 h后,大部分原生质体已再形成细胞壁。此时取样,利用质量分数为25 %的蔗糖溶液以及其他用具,通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(5)愈伤组织再分化形成的胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了 。
(6)若为了获得三七的细胞产物,则只需培养到 阶段;若为了获得三七的人工种子。则需要培养到 阶段。
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科目:高中生物 来源:2014届宁夏高三上期第三次月考生物卷(解析版) 题型:综合题
植物叶肉细胞原生质体分离和培养的主要过程可用下面的图解简单表示。
(l)图中“酶解”所用的酶应该包括 、 。
(2)原生质体的结构包括 、 、 三部分。
(3)用于植物组织培养的培养基中除了含有一定的营养外,还必须含有 、 等植物激素。
(4)一般在培养基上培养24~48 h后,大部分原生质体已再形成细胞壁。此时取样,利用质量分数为25 %的蔗糖溶液以及其他用具,通过 实验来鉴别细胞壁是否已经再生。
(5)愈伤组织再分化形成的胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了 。
(6)若为了获得三七的细胞产物,则只需培养到 阶段;若为了获得三七的人工种子。则需要培养到 阶段。
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科目:高中生物 来源:2013届江苏扬州安宜高级中学高二下学期期中考试生物试卷(解析版) 题型:综合题
研究人员为了制备烟草(四倍体,4n=48)的叶片细胞与紫罗兰(二倍体,2n=14)的紫色花瓣细胞的原生质体,并诱导其融合形成紫罗兰烟草植株,进行了如下实验:
一、原生质体的制备
酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛(以植物为食)消化腺中提取;果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果,某实验小组取无菌烟草幼叶,切成相同大小的小片,等量放入6支试管中,试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
试管编号 项目 |
Ⅰ |
Ⅱ |
Ⅲ |
Ⅳ |
V |
Ⅵ |
蒸馏水(mL) |
2 |
0 |
1 |
1 |
1 |
1 |
缓冲液(mL) |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
果胶酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
0 |
0 |
蜗牛酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
0 |
纤维素酶液(mL) |
0 |
0 |
0 |
0 |
0 |
0.5 |
实验结果(绿色深浅程度) |
— |
— |
— |
+ + + |
+ + + + |
+ + |
(注:“+”越多表示绿色越深,“—”表示颜色无显著变化)
(1)实验过程中,需要轻摇试管,其目的是 ,使原生质体从叶小片中游离出来,以便观察悬浮液绿色的深浅。
(2)从绿色的深浅可推测:蜗牛酶液酶解效果最好,原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组,其设置意义是 。
(3)如果对制取的烟草叶肉细胞原生质体是否还有活性进行检验,其检验的方法可以是 。
二、用同样方法制取紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液
三、原生质体融合
将等量的紫罗兰花瓣细胞原生质体悬浮液与烟草叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后,离心10min,将分离得到的融合成团的原生质体悬浮液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后,凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴定融合的原生质体。请分析:
(4)步骤三中,若所有的原生质体均两两融合,则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是 。
(5)只利微镜观察,不借助其他手段 (能,不能)鉴别出杂种融合的原生质体,你所依据的观用显察现象是 。
四、制取紫罗兰烟草的人工种子
(6)如下图2中,包埋形成人工种子过程中,先适当加热使海藻酸钠溶化,然后将溶化的海藻酸钠溶液 ,再加入 充分搅拌混合均匀。 若将得到的人工种子播种后成长为成紫罗兰烟草植株,杂种植株为 倍体。
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