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    13．pBV220载体是我国预防医学科学院病毒研究所自行构建并广泛应用的大肠杆菌温控载体，大小为3666bp（bp表示碱基对），其结构如下图所示．图中PRPL是启动子，rrnB是基因转录终止信号，Ampr是氨苄抗性基因，ori是质粒复制起点，EcoRⅠ、HindⅢ等为各种限制性内切酶．请据图回答下列有关问题：
    （1）从图中可看出，pBV220作为运载体具备的条件有多个限制性内切酶的切割位点、标记基因．
    （2）该质粒可被A、B、C三种限制性内切酶同时切割．单独A切割得一条长链，单独B切也得一条长链，A和C同时切割得2个500bp和1个2666bp片段，B和C同时切割得2个250bp和1个3166bp片段．若以A的切割位点为计算起点，则B的切割位点与A点最短长度为750bp，C的两个切割位点与A点的最距离分别为500bp、1000bp．
    （3）PR和PL都是启动子，pBV220载体构建过程中把两个启动子串联在一起，形成了双启动子，双启动子的作用可能是保证目的基因的高水平表达（高效转录）．温控基因CIts857编码对温度敏感的CIts蛋白，CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活．促进工程菌目的基因表达的诱导温度为42℃．

    分析 基因工程技术的基本步骤：
    1、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
    2、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
    3、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
    4、目的基因的检测与鉴定：（1）分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．（2）个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

    解答 解：（1）从图中可看出，pBV220作为运载体具备的条件有具有多个限制性内切酶的切割位点（便于目的基因的插入）、标记基因（便于鉴定和筛选含有目的基因的受体细胞）．
    （2）单独A切割得一条长链，单独B切也得一条长链，A和C同时切割得2个500bp和1个2666bp片段，B和C同时切割得2个250bp和1个3166bp片段，这说明该质粒上有一个A酶切割位点、一个B酶切割位点、2个C酶切割位点．A和C同时切割得2个500bp和1个2666bp片段，说明A和C酶的一个切点之间的长度为500bp，B和C同时切割得2个250bp和1个3166bp片段，说明B和C酶的一个切点之间的长度为250bp，若以A的切割位点为计算起点，则B的切割位点与A点最短长度为500+250=750bp，C的两个切割位点与A点的最距离分别为500bp、1000bp．
    （3）PR和PL都是启动子，pBV220载体构建过程中把两个启动子串联在一起，形成了双启动子，双启动子的作用可能是保证目的基因的高水平表达（高效转录）．温控基因CIts857编码对温度敏感的CIts蛋白，CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活，因此要促进工程菌目的基因表达就要使CIts蛋白失活，即促进工程菌目的基因表达的诱导温度为42℃．
    故答案为：
    （1）多个限制性内切酶的切割位点      标记基因
    （2）750bp     500bp     1000bp
    （3）保证目的基因的高水平表达（高效转录）     42℃

    点评 本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作步骤及相关细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    3．某校生物兴趣小组利用分布广泛的黑藻为实验材料，研究环境因素对光合作用强度的影响进行改进，图1是根据实验数据绘制的曲线，图2为黑藻叶绿体结构和功能示意图．请分析回答问题：

    兴趣小组将黑藻浸在加有适宜培养液的大试管中（室温20℃），以白炽灯为光源，通过移动白炽灯，改变光源与大试管间的距离，观测黑藻放出气泡的情况，结果如图1中曲线x所示．
    （1）该实验研究的是光照强度对光合速率的影响，用单位时间内氧气（气泡）的释放量作为光合速率的检测指标．
    （2）若将灯的距离固定在20cm，温度适宜，光照较长时间后发现试管中的黑藻在单位时间内产生的气泡数逐渐减少，产生这一现象的原因是随着光合作用的进行二氧化碳越来越少．
    （3）该小组在室温、10℃和30℃时分别进行了实验，结果如图1，D点的限制因素是温度．
    （4）研究者分离黑藻叶绿体（图2）适宜条件培养，由结构①转移至结构②物质主要是ATP和[H]．
    （5）当光源与大试管间的距离由45cm逐渐改变为90cm的过程中，图2中反应Ⅱ中的两个化学反应过程变慢的先后顺序是先C3还原，后CO2的固定．
    （6）在实验过程中，用H2l8O培养黑藻，发现叶肉细胞中出现了（CH218O），分析其最可能的转化途径是：．（用相关物质、过程和箭头表示）

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    4．下列是在生产实践中培育相应动植物的过程，请回答：
    （1）下面是培育转基因低乳糖奶牛的流程图．
    乳糖分解酶基因$\stackrel{导入}{→}$成纤维细胞→转基因胚胎$\stackrel{移植}{→}$受体母牛$\stackrel{分娩}{→}$转基因低乳糖奶牛
    乳糖分解酶基因是具有遗传效应的DNA片段，将其导入成纤维细胞中常用的方法是显微注射；转基因成功之后，通常还需要通过核移植技术将成纤维细胞的细胞核移入到去掉细胞核的卵母（去核卵母）细胞中，才能培育出转基因牛胚胎，原因是成纤维细胞的全能性受限制（卵母细胞中有促进全能性表达的物质）．应选择桑椹胚或囊胚时期的胚胎移植到受体母牛体内，受体母牛需要经过（同期）发情处理才适合进行胚胎移植．
    （2）为保持君子兰亲本的优良性状，科研人员取君子兰幼叶培养出愈伤组织，然后再从愈伤组织分化形成小植株，该过程中君子兰的生殖方式是无性生殖/营养生殖．这种技术称为植物组织培养，该技术的实际应用还有微型/快速繁殖、作物脱毒、人工种子、单倍体育种、突变体的利用、细胞产物的工厂化生产等方面（答出一点即可）．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    1．甘氨酸（Gly）在神经系统中可作为神经递质作用于下一神经元，并使下一神经元抑制，它的受体是膜上的某种离子通道．下列有关叙述中，错误的是（　　）
    A．甘氨酸与受体结合后离子通道打开，导致阳离子内流
    B．如某毒素可阻止甘氨酸释放，该毒素可破坏神经元之间正常的抑制性冲动的传递
    C．突触前膜释放甘氨酸的方式是胞吐，该过程需要消耗能量
    D．释放到突触间隙中的甘氨酸可被细胞吸收后再度利用

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    8．如图一为小肠上皮细胞吸收葡萄糖的示意图，GLUT是一种葡萄糖载体蛋白．图二表示GLUT介导的肝细胞和原核生物细胞对葡萄糖的摄取速率与葡萄糖浓度的关系．请回答下列问题：

    （1）小肠上皮细胞面向肠腔的一侧形成微绒毛的作用是增加消化和吸收的面积，与肠腺细胞合成和分泌消化酶相关的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体．
    （2）小肠上皮细胞膜上运载葡萄糖的载体有GLUT、Na+驱动的葡萄糖同向转运载体．
    （3）葡萄糖进入小肠上皮细胞时，伴随着Na+内流，在Na+-K+ATP酶的作用下消耗ATP，维持Na+在膜两侧的电化学梯度稳定，这种运输方式称为主动运输（协同转运）．
    （4）图二中的曲线表明，GLUT介导的细胞对葡萄糖的摄取速率比自由扩散高，B点与A点相比，制约葡萄糖转运速率的因素主要是GLUT数量．GLUT介导的葡萄糖运输方式称为协助扩散．

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    科目：高中生物 来源：2016届湖北省襄阳市等四校高三上期中联考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    在不同光照条件下某种植物光合速率（以O2释放量为测定指标）也有差别。下图是在两种不同条件下测定的植物一定时间内的净光合速率，请分析图中数据回答下列问题

    （1）在实验过程中，在晴天11：50时叶肉细胞产生ATP的场所有 。

    （2）在图中cd对应时段，植物体内有机物总量的变化情况是 。经测定，晴天遮光条件下该植物的CO2平均释放速率为0．8?mol/（m2·s），则a点时该植物O2产生速率为 ?mol/（m2·s）。

    （3）阴天限制叶片光合速率的主要环境因素是 。若其它条件不变，对叶绿素而言，有效辐射的光主要是 。

    （4）欲探究光照强度、温度对该植物光合作用速率的影响，实验设计中共同的对照组是___ __。

    （5）根据图中曲线可知晴天中午植物净光合作用下降，直接原因是保卫细胞 （吸水、失水），气孔关闭，导致叶肉细胞中C3含量 （增加、减少）。

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    科目：高中生物 来源：2016届湖北省襄阳市等四校高三上期中联考生物试卷（解析版） 题型：综合题

    图一、二是某小组探究H2O2分解条件时得到的实验结果．图三是该小组探究温度对淀粉酶活性影响的实验结果。试回答

    （1）鉴定H2O2酶是否是蛋白质，可用 试剂．细胞内的酶等蛋白质要不断更新，其降解过程发生在 （细胞器）中。

    （2）合成H2O2酶的直接能源物质是 ，该物质可在动物细胞的 （场所）中合成。

    （3）图一、二所代表的实验中，实验自变量依次为 、 。

    （4）根据图一可以得出的实验结论是 。图三中纵坐标y表示 。

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    科目：高中生物 来源：2016届湖北省襄阳市等四校高三上期中联考生物试卷（解析版） 题型：选择题

    用含32P标记的磷酸盐的营养液培养动物细胞，一段时间后细胞的下列结构以及化合物均有放射性的是①脱氧核糖②细胞膜③细胞壁④线粒体基质⑤转运RNA⑥叶绿体基质

    A．②④⑤⑥ B．②④⑤ C．①④⑤⑥ D．①③⑥

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    2．如图表示处于平衡状态的某生物种群因某些外界环境变化导致种群中生物个体数量改变时的四种情形，下列有关叙述中，不正确的是（　　）
    A．图④曲线可用于指导海洋捕捞，维持资源种群数量在$\frac{K}{2}$左右
    B．图③中c点后发生的变化表明生态系统的自我调节能力有一定限度的
    C．若图②所示为培养液中的酵母菌种群，则b点后的变化可能原因是天敌的减少
    D．若图①所示为草原生态系统中某人工种群，则a点后的变化可能原因是过度放牧

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