Question

【题目】如图为构建某重组质粒的过程示意图．lacZ基因可使细菌利用加入培养基的物质X﹣gal，从而使菌落显现出蓝色，若无该基因，菌落则成白色．图中甲﹣﹣戊DNA片段只注明了黏性末端处的碱基种类，其它碱基的种类未作注明．

（1）若酶M特异性识别的DNA碱基序列是，则酶N特异性识别的DNA碱基序列是_____。

（2）过程②是将所有片段混合在一起，用_____酶拼接可得到不同的重组DNA。

（3）如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中能够形成环状DNA的片段组合是_____。

A．甲和乙 B．甲和甲 C．甲和丁 D．乙和乙 E．乙和丁 F．丁和丁

（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入_____，培养一段时间，挑选出_____色的菌落进一步培养．原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点应该位于_____．

A．M位于青霉素抗性基因中，N位于lacZ基因中

B．N位于青霉素抗性基因中，M位于lacZ基因中

C．M和N都位于青霉素抗性基因中

D．M和N都位于lacZ基因中

（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物_____。

A．共用一套DNA B．共用一套RNA C．共用一套蛋白质 D．共用一套密码子

Answer 1

【答案】 DNA连接酶 ABCDEF 青霉素和X﹣gal 白 D D

【解析】

切割DNA的工具是限制性核酸内切酶，又称限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列；将DNA片段拼接成新的DNA分子用的酶是DNA连接酶；质粒经过酶M和酶N的切割形成甲、乙片段，根据甲、乙片段的黏性末端可知，酶M特异性识别的DNA碱基序列是，则酶N特异性识别的DNA碱基序列是。

（1）由以上分析可知，酶N特异性识别的DNA碱基序列是。

（2）DNA连接酶可以将具有相同黏性末端的DNA片段连接起来。

（3）甲、乙、丁都有两个黏性末端，且都相同，因此如果只考虑2个片段的组合，那么甲、乙、丁三个片段中任意两个连接都能够连接形成环状DNA。

（4）为了筛选含重组质粒的受体菌，应在通用培养基中额外加入青霉素和X﹣gal，培养一段时间，挑选出白色的菌落进一步培养．这表明青霉素抗性基因没有被破坏，lacZ基因已经被破坏，因此在原来质粒中，限制酶M和N的酶切位点都位于lacZ基因中。

（5）上述目的基因能够在受体细菌中表达，其原因是不同生物共用一套密码子。