烟草由于受烟草花叶病毒的侵染而减产.我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草．如图是转基因烟草培育过程示意图．请同答:(1)引物Ⅰ.Ⅱ是根据的脱氧核苷酸序列合成．从理论上推测.该DNA分子通过PCR扩增三次.产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为．(2)过程①表示．Ti质粒至少需含有一个至多个位点.以� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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烟草由于受烟草花叶病毒的侵染而减产，我国科学家利用基因工程技术成功培育出抗烟草花叶病毒的烟草．如图是转基因烟草培育过程示意图．

请同答：
（1）引物Ⅰ、Ⅱ是根据

的脱氧核苷酸序列合成．从理论上推测，该DNA分子通过PCR扩增三次，产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为

．
（2）过程①表示

．Ti质粒至少需含有一个至多个

位点，以供抗烟草花叶病毒基因插入其中构建基因表达载体．
（3）过程②表示

，需在人工控制条件下，将烟草细胞通过

过程形成愈伤组织，最终形成完整植株．该技术所依据的原理是

．

考点：基因工程的原理及技术,植物培养的条件及过程

专题：

分析：分析题图：图示是转基因烟草培育过程示意图．首先采用PCR技术体外扩增获得目的基因；然后构建基因表达载体；再采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞（烟草细胞）；①是将表达载体导入农杆菌细胞的过程；②是植物组织培养过程．

解答： 解：（1）PCR扩增的前提是要有一段已知核苷酸序列目的基因（抗烟草花叶病毒基因），以便合成引物Ⅰ、Ⅱ．该DNA分子通过PCR扩增三次得到2³=8个DNA片段，需要引物2³-1=7对，因此其产物中含有引物I的DNA片段所占的比例为

．
（2）由以上分析可知，过程①是将基因表达载体导入农杆菌的过程；为了便于目的基因的插入，质粒上需要至少需含有一个至多个限制酶切割位点．
（3）过程②需采用植物组织培养技术，该技术所依据的原理是植物细胞的全能性；其过程是：外植体

脱分化

愈伤组织

再分化

胚状体→新植体．
故答案为：
（1）抗烟草花叶病毒基因（或目的基因）

（2）将基因表达载体（或将含抗烟草花叶病毒基因的重组Ti质粒）转入农杆菌（或将目的基因导入受体细胞）
限制酶切割
（3）植物组织培养脱分化植物（体）细胞的全能性

点评：本题结合转基因烟草培育过程示意图，考查基因工程的原理及技术、PCR技术、植物组织培养技术，要求考生识记基因工程的使用工具及操作步骤；掌握PCR技术的原理及过程，能进行简单的计算；识记植物组织培养技术的原理、过程及应用，能结合图中信息答题．

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光照时间	0	t₁	t₂	t₃	t₄	t₅
分离出的放射性化合物	无	①	①②	①②③	①②③④⑤	①②③④⑤⑥

注：表中①～⑥依次代表：3-磷酸甘油酸（C₃H₇O₇P）；1，3-二磷酸甘油酸（C₃H₈O₁₀P₂）；3-磷酸甘油醛（C₃H₇O₇P）；己糖；C₅化合物；淀粉．

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