Question

我国科研人员发现，弯曲的蚕丝由于弯折处易断裂，其强度低于由蜘蛛纺绩器拖牵丝的直丝，并首次在世界上通过了转基因方法将“绿色荧光蛋白基因”与“蜘蛛拖牵丝基因”拼接后成功插入蚕丝基因组中，并在受体细胞中成功表达．请你根据已有的知识回答下列有关问题：
（1）在该基因工程中，绿色荧光蛋白基因的作用是

 

．
（2）在上述过程中需要多种酶的参与，其中最重要的包括限制性核酸内切酶、

 

酶．
（3）在上述过程中要形成基因表达载体，一个基因表达载体的组成，除了目的基因、标记基因外，还必须有启动子、

 

等．
（4）目的基因是否导入受体细胞，用

 

技术来检测．目的基因是否表达出相应的蛋白质，除了通过大肠杆菌是否发光来确定外，还可以通过

 

杂交技术反应来判断．
（5）如果要将重组质粒导入茶花细胞，常采用的方法是

 

，如果是要导入动物细胞，则常用哪种动物细胞作为受体细胞？

 

．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品．
基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体（常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒）．
基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达．
将目的基因导入受体细胞：（1）将目的基因导入植物细胞的方法：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法；（2）将目的基因导入动物细胞的方法：显微注射技术；（3）将目的基因导人微生物细胞的方法：用Ca²⁺处理细胞→感受态细胞．

解答： 解：（1）在该基因工程中，绿色荧光蛋白基因的作用是作为标记基因，便于筛选．
（2）基因工程至少需要三种工具酶：限制性核酸内切酶和DNA连接酶．
（3）一个完整的基因表达载体包括：目的基因、启动子、终止子、标记基因．
（4）目的基因是否导入受体细胞，用DNA分子杂交技术来检测．目的基因是否表达出相应的蛋白质，除了通过大肠杆菌是否发光来确定外，还可以通过抗原-抗体杂交技术反应来判断．
（5）如果要将重组质粒导入茶花细胞，常采用的方法是农杆菌转化法，如果是要导入动物细胞，则常用受精卵作为受体细胞．
故答案为：
（1）作为标记基因
（2）DNA连接
（3）终止子
（4）DNA分子杂交  抗原-抗体
（5）农杆菌转化法     受精卵

点评：本题考查基因工程的相关知识，只要考生识记基因工程的工具和操作步骤即可正确答题，属于考纲识记层次的考查，此类试题，需要考生在平时的学习过程中学会构建知识网络结构．