回答有关基因工程的问题:(1)基因工程的基本操作程序包括四个步骤．其中目的基因的获取方法有从中获取.利用PCR技术 .通过用化学方法直接人工合成,基因工程的核心是基因表达载体的构建.其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在.并且可以遗传给下一代.同时使目的基因 ,目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程.称� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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回答有关基因工程的问题：
（1）基因工程的基本操作程序包括四个步骤．其中目的基因的获取方法有从

中获取、利用PCR技术

、通过

用化学方法直接人工合成；基因工程的核心是基因表达载体的构建，其目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因

；目的基因进入受体细胞并在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为

；检查基因工程是否成功的关键步骤是

．
（2）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生黏性末端，也可能产生

末端．若要在限制酶切割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使二者产生

（相同、不同）黏性末端的限制酶．
（3）利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，其作用是

．在用表达载体转化大肠杆菌时，常用

处理大肠杆菌，以利于表达载体进入；为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为

．为了检测胰岛素基因转录的mRNA是否翻译成

，常用抗原-抗体杂交技术．
（4）将某目的基因导入植物细胞采用最多的方法是

，一般先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的

上，然后用该农杆菌感染植物细胞，并将目的基因插入植物细胞中的

上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达．

考点：基因工程的原理及技术

专题：

分析：基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定．
第一步：目的基因的获取
原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法．
第二步：基因表达载体的构建
（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．
（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因
第三步：将目的基因导入受体细胞
转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程．
第四步：目的基因的检测和表达
（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术．
（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交．
（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交．
（4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定．如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状．

解答： 解：（1）获取目的基因可从基因文库中获取，可利用PCR技术扩增，可通过DNA合成仪人工发合成．构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用．目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程称为转化．检查基因工程是否成功的关键步骤是目的基因的检测与鉴定．
（2）限制酶切割DNA可获得黏性末端或平末端，同种限制酶切割可获得相同的黏性末端．
（3）启动子是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，作用是驱动基因转录（出mRNA）．目的基因导入微生物细胞常用 Ca²⁺ 处理，使其成为感受态细胞．检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交，检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交．
（4）目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，农杆菌的Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上．
故答案为：
（1）基因文库   扩增    DNA合成仪   能够表达和发挥作用转化  目的基因的检测与鉴定
（2）平   相同
（3）驱动基因转录（出mRNA）   Ca²⁺ （DNA-RNA）分子杂交技术    蛋白质
（4）农杆菌转化法   T-DNA     染色体的DNA

点评：本题考查基因工程，理解基因工程的操作步骤是解题的关键，

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