圆褐固氮菌是自生固氮菌,青霉素会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖而不影响酵母菌等真菌的生长繁殖。现有圆褐固氮菌和酵母菌的混合物,请你设计一个实验,分离并得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。
(1)材料用具:(略)
(2)方法步骤:
①制备两种培养基,一种是 培养基,另一种是 培养基,将这两种培养基各自分成两份,依次标上A、a和B、b。
②分别向A、B培养基中接种混合菌,适宜条件下培养3~4天。
③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌种分别接种到a、b培养基中,在适宜条件下培养3~4天。
(3)请回答:
①本实验配制的培养基属于 培养基,实验步骤③的目的是 。
②圆褐固氮菌大量积累次级代谢产物的时期是 ,其与酵母菌在基因结构上的主要差异为 。
③青霉素抑制圆褐固氮菌的生长繁殖,其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。据此推测青霉素不影响酵母菌生长繁殖的原因是 。
④生产上常用圆褐固氮菌制成菌剂施放到土壤中,以提高农作物的产量,其原因是 。
(2)①无氮 含青霉素的
(3)①选择 得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌
②稳定期 圆褐固氮菌编码区是连续的,而酵母菌的编码区是间隔的,不连续的(2分)
③酵母菌为真核生物,其细胞壁的成分与圆褐固氮菌不同(2分)
④圆褐固氮菌可以固氮,为农作物提供氮素;可以分泌生长素,促进农作物的生长(2分)
以圆褐固氮菌和酵母菌为基础,综合考查微生物特点、培养及原核、真核生物特点等相关知识。
(2)圆褐固氮菌在无氮培养基上能生长而酵母菌不行,圆褐固氮菌在有青霉素的培养基上不能生长而酵母菌可以,所以一种是无氮培养基,另一种是含青霉素的培养基。
(3)①因为此培养基的作用是分离并得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌,所以选择培养基。
②微生物次级代谢产物积累主要在稳定期。因圆褐固氮菌是原核生物,而酵母菌则是真核生物,原核生物基因编码区是连续的,而真生物基因编码区是是间隔的,不连续的
③虽然酵母菌和圆褐固氮菌都有细胞壁,但由于圆褐固氮菌是原核生物,而酵母菌则是真核生物,它们的细胞壁成分是不同的。
④圆褐固氮菌的优点是可以固氮,为农作物提供氮素;还可以分泌生长素,促进农作物的生长。
科目:高中生物 来源: 题型:单选题
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科目:高中生物 来源:2011-2012学年安徽宿松复兴中学高二下学期第三次月考生物试卷(带解析) 题型:综合题
(10分)圆褐固氮菌是自生固氮菌,为经济有效地提高农作物产量,人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行,PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代,从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
(1)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起,已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖,但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤:
①分别配置 的培养基和 的培养基,分别分成两份,依次标上A、a、B、b备用;
②分别向A、B培养基接种 ;
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d;
④从A、B培养基上生长的 中挑取生长良好的菌株,分别接种到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
反应条件 | ||
| 温度 | 时间 |
变 性 | 95℃ | 30s |
复 性 | 55℃ | 30s |
延 伸 | 72℃ | 1min |
30个循环后 | 适宜 | 5-10min |
保 温 | 4℃ | 2h |
PCR反应体系 | 50ul |
缓冲液 | 5ul |
脱氧核苷酸 | 1ul |
引物A | 0.5ul |
引物B | 0.5ul |
DNA聚合酶 | 0.5U |
模板DNA | 1-2ul |
加去离子水补足至50 ul |
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科目:高中生物 来源:2014届甘肃秦安一中高三第一次检测生物卷(解析版) 题型:综合题
(共10分)根据各类微生物形态结构特点和新陈代谢类型,利用选择培养基和鉴别培养基,结合显微镜镜检以及菌落特征,可以把混杂在一起的大肠杆菌、乳酸菌、酵母菌、金黄色葡萄球菌、圆褐固氮菌和硝化细菌分离开来。下面是分离筛选的方法步骤,请根据各个步骤的条件,填写有关内容。(注:圆褐固氮菌能自生固氮)
⑴用无氮培养基可筛选出___________________。
⑵用不含有机碳源的选择培养基可筛选出_____________。
⑶酵母菌的筛选需要在常规培养基中另加入______________。
⑷用加了较高浓度NaCl的选择培养基可筛选出金黄色葡萄球菌,或者根据菌落的颜色呈现_________色,将其挑取单独培养 。
⑸利用伊红和美蓝培养基培养混合菌,菌落呈________色并带有 的是____________,挑取该菌单独培养,结合显微镜镜检和进一步用伊红和美蓝培养基鉴别培养来确定。
⑹在无氧条件下培养混合菌,___________________可以生长,加入一定浓度的乳酸,使培养基pH充分降低,可抑制___________的生长,利用菌落特征,结合显微镜镜检,选取生长的菌落,即可分离出____________。
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科目:高中生物 来源:2013届安徽宿松复兴中学高二下学期第三次月考生物试卷(解析版) 题型:综合题
(10分)圆褐固氮菌是自生固氮菌,为经济有效地提高农作物产量,人们一直在努力研究、寻找固氮基因。对基因的研究常常因研究样品中DNA含量太低而难以进行,PCR技术有效地解决了这个问题。如今对基因的深入研究使人类跨入了蛋白组研究时代,从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是该研究要做的基本工作之一。
(1)某同学在做微生物实验时,不小心把圆褐固氮菌样品和酵母菌样品混在一起,已知青霉素会影响固氮菌的生长繁殖,但不影响真菌的生长繁殖。请填空完成分离这两种菌的主要实验步骤:
①分别配置 的培养基和 的培养基,分别分成两份,依次标上A、a、B、b备用;
②分别向A、B培养基接种 ;
③把接种后的培养基放在恒温箱中3d—4d;
④从A、B培养基上生长的 中挑取生长良好的菌株,分别接种到 中;
⑤ 。
(2)用基因工程技术从经过分离、提纯的圆褐固氮菌中获取固氮基因,然后进行PCR扩增。下列表1和表2分别表示用PCR扩增固氮基因的反应体系及反应条件。
反应条件 |
||
|
温度 |
时间 |
变 性 |
95℃ |
30s |
复 性 |
55℃ |
30s |
延 伸 |
72℃ |
1min |
30个循环后 |
适宜 |
5-10min |
保 温 |
4℃ |
2h |
PCR反应体系 |
50ul |
缓冲液 |
5ul |
脱氧核苷酸 |
1ul |
引物A |
0.5ul |
引物B |
0.5ul |
DNA聚合酶 |
0.5U |
模板DNA |
1-2ul |
加去离子水补足至50 ul |
①从上表中可得出,PCR技术与DNA复制相比较,主要区别之一是 。
此外,从反应条件看,所使用的DNA聚合酶应具有__________的特点。每次循环都需要2种引物的主要原因是_______________ ________________。
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科目:高中生物 来源:2011-2012学年天津市高三第二次月考生物试卷 题型:综合题
氮素是合成蛋白质及核酸等成分的最主要物质。生物体中大约含有10%—15%的氮素,这种元素每年转化量约在109吨到1010吨之间,而每年通过生物固氮所提供的氮素高达4×108吨。微生物在氮素循环中有着重要的作用,请回答下列问题:
(1)大气中的N2变成植物体内的氮需要 、 等两类微生物
的共同作用;而动植物遗体中的氮回归大气中需要在 的情况下,由反
硝化细菌的作用来完成。
(2)鸡粪发酵除臭是 细菌的作用,其同化作用的类型是 ,
在生态系统中的地位是 。
(3)固氮微生物中根瘤菌是非常有名的,它活跃在豆科植物的根部形成根瘤,与豆科植
物呈现良好的共生关系,其代谢类型是 ,在生态系统中的地位是 。
(4)圆褐固氮菌属于自生固氮微生物,代谢类型为异养需氧型,在生态系统中的地位是 ,
它除具有固氮作用外,还能分泌 ,以促进植株的生长和果实的发育。
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