Question

15．回答下列关于微生物的问题
检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施．请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题：
（1）检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为（稀释）涂布平板法．如图所示的四种菌落分布图中，图D不是由该方法得到的．

（2）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至10³稀释度．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为5.6×10⁸ ．
（3）有三种材料或用具需要清毒或灭菌：（1）培养细菌用的培养基与培养皿；（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管；（3）实验操作者的双手．其中需要消毒的是（3）（填序号），需要灭菌的是（1）（2）（填序号）．
下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方．

成分	含量
蛋白胨、牛肉膏	10.0g
乳糖	5.0g
蔗糖	5.0g
K2HPO4	2.0g
显色剂	0.2g
琼脂	12.0g
将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1000mL

根据用途划分该培养基属于选择培养基（选择、通用）．该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖（蛋白胨、牛肉膏）．利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养．与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素（或生长素和细胞分裂素）
（4）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是B C_（多选）
A．制作果酒    B．由果酒制作果醋     C．制作泡菜    D．制作腐乳．

Answer 1

分析 1、分析题图：稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．A、B和C是采用稀释涂布平板法得到的，而D是采用平板划线法得到的．
2、两种纯化细菌的方法的比较：

	优点	缺点	适用范围
平板划 线分离法	可以观察菌落特征，对混合菌进行分离	不能计数	适用于好氧菌
稀释涂布 平板法	可以计数，可以观察菌落特征	吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延	适用于厌氧，兼性厌氧

3、分析表格：该培养中含有显色剂，属于鉴别培养基，其中乳糖、蔗糖（蛋白胨）是碳源．

解答 解：（1）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．
（2）首先计算三个培养基菌落数的平均值，然后再计算每升原水样中大肠杆菌数，即（55+56+57）÷3×10000×1000=5.6×10⁸个．
（3）实验操作者的双手需要进行消毒处理，而培养细菌用的培养基与培养皿需要采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，玻棒、试管、烧瓶和吸管等需要采用干热灭菌法进行灭菌．该培养基中含有显示剂，属于鉴别培养基该培养基的碳源是乳糖、蔗糖（蛋白胨）；与微生物培养明显不同的是，用于组织培养的培养基中还需要加入植物激素（或生长素和细胞分裂素）．
（4）参与果酒制作的是酵母菌，属于真核生物；参与果醋制作的是醋酸菌，属于原核生物；参与泡菜制作的是乳酸菌，属于原核生物；参与腐乳制作的是毛霉等微生物，属于真核生物．大肠杆菌是原核生物，所以细胞结构与大肠杆菌相同的是B、C．
故答案为：
（1）（稀释）涂布平板法    　D
（2）5.6×10⁸
（3）（3）（1）（2）选择     乳糖、蔗糖（蛋白胨、牛肉膏）    植物激素（或生长素和细胞分裂素） 
（4）B C

点评 本题综合考查了微生物的实验室培养、果酒和果醋的制作、泡菜的制作、腐乳的制作以及植物组织培养的相关知识，要求考生识记相关知识点；能分析表中培养基的成分，判断该培养基的类型，并能与植物组织培养的培养基进行比较．