2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光。借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。GFP基因可作为目的基因用于培育绿色荧光小鼠,如图表示培育绿色荧光小鼠的基本流程:
请根据上述材料回答下列问题:
(1)用于培育绿色荧光小鼠的基因表达载体的组成必须有启动子、________、________和________等。构建基因表达载体中,启动子是____,它位于基因的首端,是________酶识别和结合的部位,有了它才能驱动基因转录出mRNA。图中过程②常用的方法是________;
(2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达,也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性,因此GFP基因可以作为基因表达载体上的________。
(3)目前科学家们通过________工程制造出了蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等,该工程是直接改造GFP分子,还是改造GFP基因?________。该工程的基本流程是________________。(用文字和箭头)
(1)GFP基因 终止子 标记基因 一段有特殊结构的DNA片段 RNA聚合
显微注射法 (2)标记基因 (3)蛋白质 CFP基因(绿色荧光蛋白基因) 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应基因的脱氧核苷酸序列→修饰(合成)相应的基因→表达出相应蛋白质
【解析】基因表达载体的构建通常包括启动子、目的基因、终止子、标记基因构成,一般还有复制原点,启动子通常是一小段特殊的DNA分子片段,它启动转录开始,位于基因首端是RNA聚合酶识别和结合的位点。将目的基因导入动物细胞的方法通常采用显微注射法,注入的受体细胞一般为受精卵细胞。荧光蛋白基因通常作为标记基因。蓝色荧光蛋白、黄色荧光蛋白等,是自然界中没有的蛋白质,只有通过蛋白质工程对原有的基因加以改造,过程是预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应基因的脱氧核苷酸序列→修饰(合成)相应的基因→表达出相应蛋白质。
科目:高中生物 来源: 题型:
2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白”的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是
A.追踪目的基因在细胞内的复制过程
B.追踪目的基因插入到染色体上的位置
C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
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科目:高中生物 来源: 题型:
(09安徽卷)4.2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是
A.追踪目的基因在细胞内的复制过程
B.追踪目的基因插入到染色体上的位置
C.追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
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科目:高中生物 来源:2010-2011学年江西省南昌二中高二下学期期中考试生物试卷 题型:综合题
2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:
(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶Ⅰ的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是否可以连接起来, 理由是: 。
(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是______。
(3)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因,其作用是 。获得的转基因克隆猪,可以解决的医学难题是,可以避免 。
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科目:高中生物 来源:2015届广东省高一上学期期中考试生物试卷(解析版) 题型:选择题
2008年诺贝尔化学奖授予发现“绿色荧光蛋白”的三位科学家。绿色荧光蛋白是一种能发光的蛋白质,类似于示踪元素,可以标识生物体内蛋白质的位置,它照亮了人们以前看不到的世界。这种荧光蛋白能
A.跟踪大脑神经细胞的发育 B.观察癌细胞的扩散
C.改变老鼠胰岛细胞的基因 D.修复受损的脑细胞
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科目:高中生物 来源:2010~2011学年安徽省马鞍山市高二下学期期中素质测试生物试卷 题型:选择题
2008年诺贝尔化学奖授予了“发现和发展了水母绿色荧光蛋白“的三位科学家。将绿色荧光蛋白基因的片段与目的基因连接起来组成一个融合基因,再将该融合基因转入真核生物细胞内,表达出的蛋白质就会带有绿色荧光。绿色荧光蛋白在该研究中的主要作用是
A.追踪目的基因在细胞内的复制过程
B.追踪目的基因插入到染色体上的位置
C. 追踪目的基因编码的蛋白质在细胞内的分布
D.追踪目的基因编码的蛋白质的空间结构
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