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    在基因工程中，当限制性核酸内切酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口是平整的，这样的切口叫平末端，如下图所示：

    已知加入DNA连接酶后平末端的连接效率低于粘性末端，下列关于产生此现象的可能原因或改进措施的说法错误的是

    A．连接平末端时只有DNA连接酶起作用，缺乏粘性末端的突出碱基的互补作用

    B．常用的DNA连接酶与平末端的亲和力比粘性末端的大

    C．提高DNA连接酶浓度是改进平末端连接效率低下的有效方法

    D．适当提高温度也是改进平末端的连接效率低下的有效方法

    B

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    37．（8分）大肠杆菌pUC18质粒是基因工程中常用的运载体。某限制酶在此质粒上的唯一酶切位点位于LacZ基因中，如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出口一半乳糖苷酶。当培养基中含有IPTG和X-gal时，X-gal便会被β一半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。下图表示利用此质粒实施基因工程的主要流程。

           请分析并回答：

       （1）已获得的目的基因可利用    技术进行扩增。

       （2）目的基因插入质粒构建重组质粒的过程中，需要DNA连接酶恢复       键。

       （3）将试管I中的物质和大肠杆菌共同置于试管Ⅱ的目的是        ；大肠杆菌需事先用Ca2+进行处理，目的是         。

       （4）将试管Ⅱ中的菌液接种于选择培养基上培养，培养基中应含有大肠杆菌必需的营养物质包括    和生长因子，还应加入IPTG、X-gal以及氨苄青霉素，其中加入氨苄青霉素的作用是筛选出        。

       （5）若观察到培养基上出现    色菌落，则说明大肠杆菌中已成功导入了重组质粒。如果作为受体细胞的大肠杆菌也含有LacZ基因，则不利于重组质粒的筛选，原因是          。

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    科目：高中生物 来源：重庆一中2010级高三下学期考前模拟理综生物 题型：综合题

    Ⅰ、（12分）有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，就会受到病毒感染而死亡。原因是其体内缺乏一种腺苷酶基因。其治疗方案如右图所示。
    （1）仿照上述方案设计一个为某男性患者治疗血友病的方案，请完成有关步骤：
    第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；
    第二步：提取目的基因；
    第三步：                             
    第四步：将重组体（即重组DNA）导入受体细胞，即让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染在体外培养的                   
    第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞是否导入了正常凝血因子基因，并检测是否产生了                 
    第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，并在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。
    （2）基因工程中常用到的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞等，此处取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，是为了防止发生          。

    （3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两片段间连接产物中至少有         种环状DNA分子。它们分别是                                  
                              。
    Ⅱ、（10分）如图为高等动物细胞亚显微结构模式图。请据图作答：
    （1）若此图示旺盛分泌肠液（含多种消化酶）的小肠上皮细胞，则其形态结构必然具有下列         （填序号）特点。
    ①细胞分泌面有较多的皱褶；②皱褶下和内质网附近分布着较多的线粒体；③细胞的内质网与高尔基体很发达；④细胞内核糖体丰富。
    （2）如果该细胞是效应B细胞，培养在含放射性标记的某种氨基酸的培养基中，之后在产物中检测到带有放射性的抗体。放射性出现的先后顺序应该是          
    （可供选择的物质和结构是①细胞核  ②核糖体  ③染色体  ④线粒体  ⑤内质网  ⑥细胞膜  ⑦中心体  ⑧高尔基体）
    （3）若此图示衰老的细胞，除细胞核体积增大外，细胞膜发生的变化是                      
                         。

    （4）右图为该细胞进行细胞分裂过程中不同时期的细胞图像，则该高等动物的性别是       ，其体细胞中染色体数目是         。

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    科目：高中生物 来源：重庆一中2010级高三下学期考前模拟理综生物 题型：综合题

    Ⅰ、（12分）有一种病人不能抵抗疾病，只能生活在无菌室里，如果离开无菌室，就会受到病毒感染而死亡。原因是其体内缺乏一种腺苷酶基因。其治疗方案如右图所示。

    （1）仿照上述方案设计一个为某男性患者治疗血友病的方案，请完成有关步骤：

    第一步：取出患者的皮肤细胞进行细胞培养；

    第二步：提取目的基因；

    第三步：                              

    第四步：将重组体（即重组DNA）导入受体细胞，即让这种携带有正常凝血因子基因的无害病毒去感染在体外培养的                   

    第五步：根据病毒上的标记基因检测皮肤细胞是否导入了正常凝血因子基因，并检测是否产生了                  

    第六步：将含有目的基因的皮肤细胞扩大培养，当各种指标达到要求后，再与胶原细胞混合，制成注射针剂。将含有这种活细胞的针剂注射到患者体内，并在患者体内表达，使患者的凝血因子达到可以止血的含量。

    （2）基因工程中常用到的受体细胞有细菌、真菌和动植物细胞等，此处取患者本人的皮肤细胞作为受体细胞进行培养，是为了防止发生           。

    （3）假设以大肠杆菌质粒作为运载体，并以同一种限制酶切割运载体与目的基因，将切割后的运载体与目的基因片段混合，并加入DNA连接酶。两两片段间连接产物中至少有          种环状DNA分子。它们分别是                                   

                               。

    Ⅱ、（10分）如图为高等动物细胞亚显微结构模式图。请据图作答：

    （1）若此图示旺盛分泌肠液（含多种消化酶）的小肠上皮细胞，则其形态结构必然具有下列          （填序号）特点。

    ①细胞分泌面有较多的皱褶；②皱褶下和内质网附近分布着较多的线粒体；③细胞的内质网与高尔基体很发达；④细胞内核糖体丰富。

    （2）如果该细胞是效应B细胞，培养在含放射性标记的某种氨基酸的培养基中，之后在产物中检测到带有放射性的抗体。放射性出现的先后顺序应该是           

    （可供选择的物质和结构是①细胞核  ②核糖体  ③染色体  ④线粒体  ⑤内质网  ⑥细胞膜  ⑦中心体  ⑧高尔基体）

    （3）若此图示衰老的细胞，除细胞核体积增大外，细胞膜发生的变化是                       

                          。

    （4）右图为该细胞进行细胞分裂过程中不同时期的细胞图像，则该高等动物的性别是        ，其体细胞中染色体数目是          。

     

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    （08衡阳八中模拟）I. （16分）为研究酵母菌发酵的产物，某研究小组设计了如图所示的装置图。①号、②号试管中均加入3mL蒸馏水和少许0．1％溴麝香草酚蓝（简称BTB），直至溶液呈蓝绿色时为止。（当环境偏酸性时，BTB溶液呈黄色）请回答下列问题：

    （1）该实验是否可以去掉②号试管?_______。请说明理由：                           。

    （2）①号试管的现象是____________，其作用是_______________。

    （3）该实验中需要等到煮沸的葡萄糖液冷却后才能加酵母菌，原因是________________。

    （4）图乙中哪条曲线能正确表示气泡释放速率的变化？___________。

    （5）若要证明释放的气泡是酵母菌所产生的，就需要设置一个对照实验，该对照实验应在原实验的基础上做哪些改动？______________________。

    Ⅱ．我国科学家根据农业的需要，将一种来自螺旋藻中的与光合作用相关的基因移植到普通水稻基因中，该转基因水稻的生长周期显著缩短，光合作用速率增长70％，淀粉含量大幅增加，达到了周期短、见效快、粮食增产的目的。   

    （1）在该基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，以便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是―↓GATC―，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是 ―G↓GATCC―，根据图示判断，正确的操作应该是用___________切割质粒，用______________来切割目的基因片段。

       

     

    （2）为了避免转基因水稻携带的目的基因通过花粉传递给近缘物种，最好将该基因植入水稻细胞的____________的DNA中。

    （3）简要写出确定“螺旋藻基因是转移到水稻的叶绿体内还是转移到染色体上?”的步骤。

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    （08银川一中一模）【现代生物科技专题】

    I．（8分）加利福尼亚大学的一组科学家通过基因工程技术成功地将萤火虫的荧光素酶基因导入到大肠杆菌体内。

    （1）在此基因工程中，科学家通过反转录法获得目的基因，此方法需要使用的酶__________（两种）。

    （2）将目的基因导入大肠杆菌需要运载体的帮助。作为运载体需具备的条件有________。

    A．能够在宿主细胞内复制并稳定保存   B．具有特定的限制酶切点

    C．具有与目的基因相同的碱基片断     D．具有某些标记基因

     

    （3）培育能发荧光的植物是生物工程学家的美好愿望之一。如果利用基因工程技术将荧光素酶基因成功导入植物细胞，并使之表达。请简述利用这些转基因细胞培育成能发荧光的植物幼苗的过程。

     

    II．（7分）干扰素是一类具有很高生物活性的糖蛋白，它具有抑制多种病毒复制的功能，是一种广谱抗病毒物质。为了能在体外获得大量的干扰素，有人进行了实验，可是当将T淋巴细胞在体外培养繁殖了几代后，细胞分裂就停止了。请你用细胞工程的方法，以小鼠为实验对象，提出一个既能使T淋巴细胞在体外培养繁殖，又能获得大量干扰素的实验设计思路。

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