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    【题目】尿素是一种高浓度氮肥用长期施用没有不良影响，但尿素只有通过土壤中某些细菌分解为氨后,才能被植物吸收利用．分解尿素的细菌都能合成脲酶,脲酶能催化尿素水解．某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下：

    KH2pO4

    Na2HP04

    MgS04·7H20

    蛋白胨

    葡萄糖

    尿素

    琼脂

    1．4g

    2．1g

    0．2g

    l．Og

    10．Og

    l．Og

    15．Og

    （1）根锯培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌_____ （能/不能），原因是______ ．不能选择出只分解以尿素为氮源的微生物。

    （2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用__________法接种,根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积,统计平板上的_______________就能大约推测出样品中活菌数。

    （3）接种前要对培养基进行___________。在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在_______条件下进行。

    （4） 一同学在纯化土壤中的细菌时,发现培养基上的菌落连成一片,最可能的原因是_____,应当怎样操作才可避免此种现象？_______________________。

    （5）从胡萝卜中提取胡萝卜素常用的方法是______________。对胡萝卜进行粉碎、干燥时，要特别注意干燥的______________和时间，以防止胡萝卜焦糊。提取过程中宜采用______________方式加热,以保障安全。

    （6）进行植物组织培养时,通常选用______________进行培养可以获得不含病毒的脱毒苗。长出的丛芽需及时转移到诱导生根培养基上进行生根培养，与诱导丛芽培养基相比，诱导生根培养基中应增加______________ （激素）含量。

    【答案】

    （1）不能 培养基含蛋白胨,尿素不是唯一氮源

    （2）稀释涂布平板 菌落数目

    （3）灭菌 无菌

    （4）菌液浓度过离 对菌液进行梯度稀释（加大稀释倍数）

    （5）萃取法 温度 水浴

    （6）茎尖（芽类、根尖）分生组织 生长素

    【解析】

    试题分析：

    （1）由图可知，培养中蛋白胨中含有N元素，尿素不是唯一氮源，所以不能分离出尿素分解菌。（2）要统计每克土壤样品中活菌数目，宜采用稀释涂布平板法，最终将每个细胞培养成菌落，所以可根据菌落数目判断活菌数。（3）接种前防止杂菌污染，需要对培养基灭菌处理，培养过程要进行无菌操作。（4）纯化细菌时，如菌液浓度过高，则培养基中的菌落可能连成一片，需要浆菌液加大稀释倍数以避免此种现象出现。（5）提取胡萝素常用的方法是萃取法，干燥时要注意控制好温度和时间，防止胡萝卜焦糊。提取时要水浴加热。（6）由于分生组织中几乎不含有病毒，常选用茎尖（芽类、根尖）分生组织进行培养。生长素具有促进生根的作用，所以诱导生根需要增加生长素的含量。

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