Question

长期以来 ,香蕉生产遭受病害的严重威胁 ,制约了其发展。目前 ,随着转基因抗病香蕉基因工程技术的日趋成熟 ,为培育抗病香蕉品种开辟了新途径。转基因抗病香蕉的培育过程如图所示，质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：

(1)构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶             ，对          进行切割。
(2)培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有         ，作为标记基因。
（3）能使抗病基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是：     (填字母序号)。
A.启动子   B.终止子  C.复制原点   D.标记基因
（4）将目的基因导入植物细胞常用方法有多种，图中所示方法为         。
（5）欲检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因，可采用的技术是       ，欲检测目的基因是否转录出了mRNA，可采用的技术是     ，欲检测目的基因是否表达成功，可采用的技术       (填字母序号，各1分)。
A.分子杂交技术   B. DNA分子杂交技术    C. 抗原-抗体杂交技术   D. PCR

Answer 1

（1）PstⅠ、 EcoRⅠ（答全给分）  含抗病基因的DNA、质粒（答全给分）
（2）抗卡那霉素基因
（3）AB
（4）农杆菌转化法
(5)B  A  C(各1分)

解析试题分析：
（1）根据图示，选用限制酶切割时不能破坏抗病基因，所以应选用PstⅠ和EcoRⅠ对含有抗病基因的DNA和质粒进行切割。
（2）因为培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，所以如果想利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有抗卡那霉素基因，以便作为标记基因，进行筛选。
（3）抗病基因必需具有调控序列：启动子和终止子，才能在香蕉细胞中特异性表达。
（4）将目的基因导入植物细胞的方法有：农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法，图中采用的是最常用的农杆菌转化法。
（5）检测目的基因是否成功表达，可采用的方法有DNA分子杂交技术、分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术。其中检测转基因生物的DNA上是否插入了目的基因应用DNA分子杂交技术，检测目的基因是否转录出了mRNA，应用分子杂交技术，检测目的基因是否表达成功，应用抗原-抗体杂交技术。
考点：本题考查基因工程的有关知识，意在考查考生识图能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力；能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断或得出正确的结论。