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    8．为了获得抗体基因功能缺失的转基因山羊，拟采用体细胞基因打靶技术，通过体细胞的同源重组，敲除山羊的抗体重链基因，并以其为受体转入人的抗体基因，用于制备完全人源化抗体．获得抗体基因功能缺失的转基因山羊的过程如图所示．

    （1）过程①的处理方法是胰蛋白酶．
    （2）过程②中每3～4天更换一次培养液，目的是清除代谢废物．为了防止培养过程杂菌污染，培养液中需添加一定量的抗生素．
    （3）过程③电穿孔的目的是诱导质粒导入受体细胞．使GTIgH质粒线性化的处理方法是用限制酶处理．
    （4）过程⑤PCR鉴定的过程是将细胞中的DNA提取出来，用PCR技术进行扩增，然后用DNA分子杂交原理进行鉴定．
    （5）经过程⑤获得的抗体基因功能缺失的细胞不能直接诱导分化得到抗体基因功能缺失的转基因山羊，原因是动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱．
    （6）过程⑥涉及到的技术有细胞核移植．

    分析 据图示可知，①②为动物细胞培养的过程，③为诱导质粒导入受体细胞的过程，④为细胞培养过程，⑤为特定细胞的筛选过程，⑥为动物克隆过程．

    解答 解：（1）动物细胞培养时，需用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液，然后进行原代培养；待细胞贴满瓶壁后，再用胰蛋白酶分散为单个细胞，制成细胞悬液，进行传代培养．
    （2）过程②中每3～4天更换一次培养液，目的是清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害．由于抗生素能抑制细菌生长，为了防止培养过程杂菌污染，培养液中需添加一定量的抗生素．
    （3）过程③电穿孔的目的是诱导质粒导入受体细胞．使GTIgH质粒线性化的处理方法是用限制酶处理．
    （4）鉴定DNA分子是否含有特定的基因可用DNA分子杂交技术进行鉴定．
    （5）动物细胞不能直接培养获得动物体，原因是动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱．
    （6）过程⑥为克隆过程，涉及到的技术有细胞核移植．
    故答案为：
    （1）胰蛋白酶 
    （2）清除代谢废物  抗生素 
    （3）诱导质粒导入受体细胞  限制酶
    （4）DNA分子杂交 
    （5）动物细胞的全能性随分化程度提高而受到限制，分化潜能变弱  
    （6）细胞核移植

    点评 本题考查了基因工程的应用和细胞过程等相关知识，意在考查考生的识记能力和理解所学知识要点，把握知识间内在联系，形成知识网络结构的能力；能运用所学知识，对生物学问题作出准确判断的能力．

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