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(10分)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法,请分析回答下列问题:

(1) 从肝细胞中分离总RNA,经_________获得cDNA,之后经过_________扩增内皮抑素基因。

(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒(如图14所示)都用EcoR I和BamH I进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接,还减少了________的连接,提高了重组质粒的比例。

(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。

选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落,原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌,其突出的优点是:___________________________________

(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并,______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

 

【答案】

 

【解析】略

 

练习册系列答案
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科目:高中生物 来源: 题型:

研究人员对几种植物的分生组织的细胞周期进行研究,获得的结果如下表。

植物

细胞周期时间(h)

a期(h)

b期(h)

合计

物种Ⅰ

10.6

0.4

11

物种Ⅱ

18

0.5

18.5

物种Ⅲ

16.5

2

18.5

物种Ⅳ

10.4

2.3

12.7

(1) a期属细胞周期中的       期,此时,细胞内的主要变化是                   

(2) 用光镜观察有丝分裂过程,若从细胞周期的时间考虑最好选择物种     的细胞作

为实验材料,因为                                                         

(3) 从生物学的意义看,a期比b期长的好处是                                

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科目:高中生物 来源:2010-2011学年广东省培正中学高一下学期期中考试生物试卷 题型:综合题

研究人员对几种植物的分生组织的细胞周期进行研究,获得的结果如下表。

植物
细胞周期时间(h)
a期(h)
b期(h)
合计
物种Ⅰ
10.6
0.4
11
物种Ⅱ
18
0.5
18.5
物种Ⅲ
16.5
2
18.5
物种Ⅳ
10.4
2.3
12.7
(1) a期属细胞周期中的      期,此时,细胞内的主要变化是                  
(2) 用光镜观察有丝分裂过程,若从细胞周期的时间考虑最好选择物种    的细胞作
为实验材料,因为                                                        
(3) 从生物学的意义看,a期比b期长的好处是                                

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科目:高中生物 来源:2013届广东省高一下学期期中考试生物试卷 题型:综合题

研究人员对几种植物的分生组织的细胞周期进行研究,获得的结果如下表。

植物

细胞周期时间(h)

a期(h)

b期(h)

合计

物种Ⅰ

10.6

0.4

11

物种Ⅱ

18

0.5

18.5

物种Ⅲ

16.5

2

18.5

物种Ⅳ

10.4

2.3

12.7

(1) a期属细胞周期中的       期,此时,细胞内的主要变化是                   

(2) 用光镜观察有丝分裂过程,若从细胞周期的时间考虑最好选择物种     的细胞作

为实验材料,因为                                                         

(3) 从生物学的意义看,a期比b期长的好处是                                

 

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科目:高中生物 来源:2012届北京市海淀区高三上学期期中练习生物试卷 题型:综合题

(10分)研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂一内皮抑素,它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法,请分析回答下列问题:

(1) 从肝细胞中分离总RNA,经_________获得cDNA,之后经过_________扩增内皮抑素基因。
(2) 扩增的目的基因与PUC18质粒(如图14所示)都用EcoRI和BamH I进行双酶切,然后用DNA连接酶进行连接,构建重组质粒。双酶切避免了目的基因与载体________连接,还减少了________的连接,提高了重组质粒的比例。
(3) 大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之,则形成白色菌落。
选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入_______物质。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成______________颜色的菌落,原因是_____________________。之所以选择大肠杆菌作为基因工程的受体菌,其突出的优点是:___________________________________
(4) 从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养,获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板,370C培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中,72h后在显微镜下观察细胞存活情况并,______________实验结果如下表所示。

结果说明__________________________________________

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