Question

【题目】2019年末，武汉出现由SARS - CoV -2病毒引发的COVID - 19肺炎，该病毒的遗传物质为单链RNA。请回答下列有关问题：

（1）间接免疫荧光法（如图）：把冠状病毒标本固定在玻片上，然后将待测病人的血清滴在玻片上，特异性抗体与标本中抗原反应后，再加入荧光素标记的第二抗体（与第一抗体特异性结合），洗涤后在荧光显微镜下观察，若_______________，则说明待测病人为新冠肺炎患者。

（2）研究表明，从恢复期患者的血清中提取相应抗体用于治疗COVID - 19患者，其临床状况已有明显改善。但是血清抗体具有___________的特点，因此治疗用途受到限制。为此，进行如下尝试：

①研究组一：选用单克隆抗体技术将B淋巴细胞与骨骼瘤细胞进行融合，再用_______培养基进行筛选，在该培养基上，____________的细胞和_________________的细胞都会死亡。

②研究组二：用EB病毒感染人类B淋巴细胞建立连续分裂永久生存的细胞系，所得细胞经过稀释后，多孔培养板中每个孔中细胞数量不多于______个，再进行_________________培养并筛选，以便于最终得到能产生特异性抗体的永生化B淋巴细胞。

（3）该病引发了人们对生物武器的讨论，生物武器种类包括病菌、病毒、________，和经过基因重组的致病菌等。世卫组织负责人多次表示，没有任何证据表明新冠病毒是实验室产生。

Answer 1

【答案】出现荧光标记（出现阳性反应） 产量低、纯度低、特异性差 选择 未融合 同种（核）融合（合理给分） 1 克隆化（扩大） 生化毒剂

【解析】

1、体液免疫过程为：（1）除少数抗原可以直接刺激B细胞外，大多数抗原被吞噬细胞摄取和处理，并暴露出其抗原决定簇；吞噬细胞将抗原呈递给T细胞，再由T细胞呈递给B细胞；（2）B细胞接受抗原刺激后，开始进行一系列的增殖、分化，形成记忆细胞和浆细胞；（3）浆细胞分泌抗体与相应的抗原特异性结合，发挥免疫效应。

2、单克隆抗体的制备

（1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞

（2）获得杂交瘤细胞

①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；

②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。

（3）克隆化培养和抗体检测

（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖

（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取

3、单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高、并可大量制备。

（1）在荧光显微镜下，玻片有荧光显现，说明病人已感染新型冠状病毒。

（2）因为康复者血清中存在抗体，可以用康复者血清治疗新冠型肺炎。但由于血清抗体产量低、纯度低、特异性差，因此治疗用途受到限制。

①单克隆抗体制备过程中，将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后需要采用选择培养基进行第一次筛选，通过选择培养的筛选，未融合的细胞和同种（核）融合的细胞不能生长繁殖，会死亡。

②进行克隆化培养过程中，利用多孔培养板对细胞进行稀释时，每个孔中的细胞数量不多于1个，再进行克隆化培养并抗体阳性筛选。

（3）生物武器种类包括致病菌、病毒、生化毒剂，以及经过基因重组的致病菌等。把这些病原体直接或者通过食物、生活必需品等散布到敌方，可以对军队和平民造成大规模杀伤后果。