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    如图所示组织型纤维酶原激活剂（tPA）的生产过程．二氢叶酸还原酶（DHFR）能催化二氢叶酸还原成四氢叶酸，缺少该酶的仓鼠卵巢细胞不能合成四氢叶酸，只能在添加胸苷、甘氨酸和嘌呤的培养基中生长，转入DHFR基因的缺失型细胞可在不含胸苷、甘氨酸和嘌呤的培养基中生长．叶酸的类似物氨甲喋呤存在时，可与叶酸竞争DHFR并抑制它的活性，使细胞死亡．当DHFR基因大量扩增并表达时，氨甲喋呤不足以结合全部的DHFR，细胞能在含有氨甲喋呤的培养基中存活．请回答：
    （1）图中HindⅢ和EcoRⅠ示两种限制酶的酶切位点，将组织型纤维酶原激活剂（tPA）基因插入载体时，用HindⅢ和EcoRⅠ两种限制酶同时切
     
    ，与只使用EcoRⅠ一种限制酶相比，其优点是可以防止
     
    ．同时，在酶切的反应体系中加入
     
    酶，即可得到
     
    ．
    （2）已知HindⅢ酶的识别序列是AAGCTT，酶切位点在AA之间，请写出此酶切割后的粘性末端：
     

    （3）载体上的DHFR基因在基因工程中称为
     
    ，1号培养基中不应该加入
     
    ，2号培养基中应该加入
     
    ，1号和2号培养基在功能上属于
     
    培养基．
    （4）在2号培养基上存活的细胞还需进行
     
    活性的检测，才能大规模培养以获得相应的产品．
    考点：基因工程的原理及技术
    专题：
    分析：1．在切割目的基因和运载体时，一定要使用同一种限制性内切酶，这样，切出的切口才一样，才能进行碱基互补配对连接起来．两个黏性末端只要一样就可以进行碱基互补配对，再通过DNA连接酶连接起来．
    2．选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基．其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选效率．
    解答： 解：（1）在切割目的基因和运载体时，一定要使用同一种限制性内切酶，这样，切出的切口才一样，才能进行碱基互补配对连接起来．两个黏性末端只要一样就可以进行碱基互补配对，再通过DNA连接酶连接起来，形成重组质粒．只使用EcoRⅠ一种限制酶切割的话可能目的基因和运载体产生的两端末端是相同的，会引起质粒或tPA基因（载体或目的基因）自身连接．
     （2）已知HindⅢ酶的识别序列是AAGCTT，酶切位点在AA之间，请写出此酶切割后的粘性末端  
     （3）转入DHFR基因的缺失型细胞可在不含胸苷、甘氨酸和嘌呤的培养基中生长．叶酸的类似物氨甲喋呤存在时，可与叶酸竞争DHFR并抑制它的活性，使细胞死亡．当DHFR基因大量扩增并表达时，氨甲喋呤不足以结合全部的DHFR，细胞能在含有氨甲喋呤的培养基中存活．可推出载体上的DHFR基因可作为标记基因．转入DHFR基因的缺失型细胞可在不含胸苷、甘氨酸和嘌呤的培养基中生长，故1号培养基中不应该加入胸苷、甘氨酸、嘌呤．当DHFR基因大量扩增并表达时，氨甲喋呤不足以结合全部的DHFR，细胞能在含有氨甲喋呤的培养基中存活，故2号培养基中应该加入氨甲喋呤．1和2号培养基都是选择性培养基．
    （4）在2号培养基上存活的细胞虽能产生组织型纤维酶原激活剂，但不一定具有所需要的活性，因此还需要进行筛选检测，才能大规模培养以获得相应的产品．                                                                                       
    故答案为：
    （1）质粒和tPA基因（质粒和目的基因）    质粒或tPA基因（载体或目的基因）自身连接    DNA连接    重组载体（重组DNA）
    （2）-A    AGCTT-
    -TTCGA     A-
    （3）标记基因    胸苷、甘氨酸、嘌呤    氨甲喋呤    选择
    （4）tPA（组织性纤维酶原活性剂）
    点评：本题考查了基因工程的过程和微生物培养的相关内容，意在考查考生识图获取有效信息的能力和理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．
    练习册系列答案
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    如图是高等动物甲状腺激素分泌调节示意图．下列叙述中正确的是（　　）
    A、在寒冷环境中，激素①的分泌减少，③的分泌增加
    B、切除垂体后，①的分泌会增加，③的分泌会立即停止
    C、切除甲状腺后，①和②的分泌会增加，但不促进代谢
    D、给动物注射③，反馈调节使①和②的分泌增加

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列各项物质中，由相同种类元素组成的是（　　）
    A、胆固醇、油脂酸、油脂酶
    B、氨基酸、核苷酸、丙酮酸
    C、淀粉、半乳糖、糖原
    D、性激素、生长激素、胰岛素

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    原核生物大多数基因表达的调控是通过操纵子（operon）机制实现的．操纵子通常由2个以上的编码序列与启动序列、操纵序列以及调节序列在基因组中成簇串联组成．其中启动序列是RNA聚合酶与之结合并起动转录程序的特异DNA序列；调节序列能控制合成成相应的调节蛋白，来调节转录程序；操纵序列如果被阻遏蛋白（一种调节蛋白） 结合时会阻碍RNA聚合酶与启动序列的结合，从而阻止转录起动．当大肠杆菌生存环境中缺乏乳糖时，体内β-半乳糖酶基因（Z）、通透酶基因（Y）和乙酰转移酶基因（A）的表达会被关闭，从而不能正常参与乳糖代谢过程（如图1所示）；当大肠杆菌依赖乳糖生长时，体内上述三种基因的表达则被激活（如图2所示）．请分析回答下列问题：

    （1）图中所示a物质表示
     
    ，它与DNA成功结合后会引起DNA结构的变化，这种变化是
     
    ．
    （2）图中所示c过程表示
     
    ，d物质表示
     
    ；O区域的碱基序列对应为乳糖操纵子中的
     
     序列．
    （3）在图2所示的乳糖操纵子中，决定“”的详细碱基序列为
     
    ．
    （4）当大肠杆菌依赖乳糖生长时，体内β-半乳糖酶基因（Z）、通透酶基因（Y）和乙酰转移酶基因（A）等三种基因被激活的机理是
     
    ．
    （5）操纵子所包括的序列中，能够转录的序列为
     
    ．
    （6）由题干信息可知，原核细胞基因表达的起始调控从根本上来说是受（
     
    因子）控制，而真核细胞基因表达的起始调控从根本上来说是（
     
    因子）控制．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    酸性磷酸酶（简称ACP）在动、植物和微生物细胞中广泛存在，它是调控磷代谢的重要酶类，其最适pH为4.8．鲫鱼生活的水体中常有金属离子污染，危害了鲫鱼的生长和繁殖．研究者从鲫鱼内脏中分离纯化得到一种ACP，研究了金属离子对该酶活性的影响．实验结果如图所示：

    （1）本实验的自变量为
     
    ．
    （2）该实验中，应使用蒸馏水配制实验所需的不同离子浓度的溶液，而一般不用自来水，其主要目的是
     
    ．
    （3）各反应体系均加入等量的pH为4.8的缓冲液，其目的是
     
    ．实验组试管中加入等量的不同浓度的Pb2+、Cd2+，Mg2+、Ca2+溶液和ACP酶溶液，另取一支试管加入
     
    作为对照．
    （4）分析图甲的两条曲线，可得出的结论是
     
    ．
    （5）除了本题涉及的因素外，影响酶活性的因素还有
     
    ．

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性．研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示．

    （1）进行①过程的目的是
     
    ；②过程所使用的接种方法是
     
    法．
    （2）从用途上来说，Ⅰ号培养基属于
     
    培养基，仅以淀粉作为
     
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    作为凝固剂．
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    ；一般对配制的培养基采用
     
    法灭菌．
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    下列关于细胞结构与功能的叙述，不正确的是（　　）
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    水在生物体内是一种良好的溶剂，是各种化学反应的介质．下列有关水的说法正确的是（　　）
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    C、当人体缺水时，血浆的浓度会降低
    D、构成生物膜的主要成分是蛋白质、磷脂和水

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    某XY型性别决定的试验动物，正常体细胞中有26条常染色体．下图是科学家对其一条染色体上部分基因的测序结果．该试验动物鼻的高矮受一对等位基因控制，基因型BB为高鼻，Bb为中鼻，bb为矮鼻．长毛与短毛受另一对等位基因控制（用C、c表示），只要有一个C基因就表现为长毛．以下有关叙述正确的是（　　）
    A、该动物体内的此染色体上的基因最终都能全部表达，只是表达的时间或细胞可能不同
    B、欲开展该试验动物基因组计划，应测定15条染色体中的基因序列
    C、选用高鼻短毛与矮鼻长毛两个纯种品系做杂交实验，可以验证基因自由组合定律
    D、若该染色体上同时还有短毛基因c，则一般情况下可用光学显微镜检测该类型遗传病

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