Question

5．下列关于重组DNA分子构建的相关叙述，不正确的是（　　）

• A． 需要限制酶和DNA连接酶
• B． 必须在细胞内进行
• C． 抗生素抗性基因可作为标记基因
• D． 重组DNA分子能在受体细胞内增殖

Answer 1

分析 1、DNA重组技术至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．
2、基因工程技术的基本步骤：
（1）、目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）、基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）、将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）、目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、基因表达载体的构建过程中需要限制酶和DNA连接酶，A正确；
B、基因表达载体的构建过程在细胞外进行，B错误；
C、抗生素抗性基因可作为标记基因，有利于筛选含重组DNA的细胞，C正确；
D、基因表达载体构建后，可将目的基因导入受体细胞，重组DNA分子能在受体细胞内增殖、扩增，D正确．
故选：B．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确判断各选项．