Question

4．反转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示．图上的“反转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因．（E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点）．
（1）反转录的原料是（四种）脱氧核苷酸．
（2）在构建重组质粒时，目的基因应插入到该质粒的位置是F（或：反转录病毒序列），此过程需使用的酶是限制酶和DNA连接酶．为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素A的培养基进行培养．获取大量重组质粒后，将其再转入到某种哺乳动物细胞中，可获得大量重组反转录病毒．

Answer 1

分析 据图分析，基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心，基因工程载体的条件是能在受体细胞中保存并大量复制、有一至多了限制性内切酶切点和有特殊的遗传标记基因，便于进行筛选．反转录酶序列中有限制酶F的切割位点，目的基因与运载体结合，在粘性末端碱基互补配对，需要DNA连接酶作用于磷酸二酯键，形成重组DNA分子；该质粒上有具有的遗传标记基因是抗生素A抗性基因，可以用加有抗生素A的选择培养基进行筛选．

解答 解：（1）逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程，所需要的模板为RNA，原料为四种脱氧核苷酸．
（2）基因工程需要工具酶是限制酶和DNA连接酶；用到的限制酶不能破坏标记基因（抗生素A抗性基因），且应该整合到“逆转录病毒序列”上；抗生素A抗性基因为标记基因，用来帮助筛选目的基因．
故答案为：
（1）（四种）脱氧核苷酸       
（2）F（或反转录病毒序列）　   限制酶和DNA连接酶　    抗生素A

点评 本题考查RNA复制，逆转录需要的模板、原料，重组质粒时目的基因的插入位点的知识，意在考查学生识图能力、信息的提取与应用能力、通过比较与综合做出合理判断的能力等．