木聚糖酶系可以将半纤维素转化为单细胞蛋白其他有用物质．有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶.在食品工业上具有较高的潜在应用价值．现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌.并从中筛选木聚糖酶高产菌株.获得耐热木聚糖酶．回答下列问题:(1)取适量体积的样品涂布在富含半纤维素的固体培养基上.置于65℃(原因是此温度是嗜热菌生活的适宜温度)的培养箱中培养.� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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16．木聚糖酶系可以将半纤维素（一种多糖）转化为单细胞蛋白其他有用物质．有些嗜热菌能产生耐热木聚糖酶，在食品工业上具有较高的潜在应用价值．现欲从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌，并从中筛选木聚糖酶高产菌株，获得耐热木聚糖酶．回答下列问题：
（1）取适量体积的样品涂布在富含半纤维素的固体培养基上，置于65℃（原因是此温度是嗜热菌生活的适宜温度）的培养箱中培养，菌落长出后，挑取单个菌落在培养基上用平板划线法或稀释涂布平板法接种培养，进行菌株的分离纯化．将得到的菌株接种到液体（固体/液体）培养基中富集．
（2）将富集后的菌株接种于固体培养基上，待菌落长出后用0.1%的刚果红溶液染色1h，再用lmol/L NaCl脱色．菌落周围会出现透明圈，筛选透明圈（直径）大的菌落即为木聚糖酶高产菌株．

分析 1、分解纤维素的微生物的分离实验的原理：
①土壤中存在着大量纤维素分解酶，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶．纤维素酶是一种复合酶，可以把纤维素分解为纤维二糖，进一步分解为葡萄糖使微生物加以利用，故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长．
②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌．
2、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．

解答解：（1）要从温泉中分离能分解半纤维素的嗜热菌，应该选用以半纤维素为唯一碳源的培养基；嗜热菌生活的适宜温度是65℃，因此应该置于65℃的培养箱中培养；进行菌株的分离纯化时，常用的接种方法为平板划线法或稀释涂布平板法；将得到的菌株接种到液体培养基中富集．
（2）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈．透明圈越大，说明分解能力越强，因此筛选透明圈（直径）大的菌落即为木聚糖酶高产菌株．
故答案为：
（1）半纤维素嗜热菌生活的适宜温度平板划线法或稀释涂布平板分离纯化液体
（2）刚果红溶液透明圈透明圈（直径）大

点评本题主要考查纤维素分解菌的筛选与分离即培养的相关知识，意在强化学生相关知识点的分析和理解能力．

练习册系列答案

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