分析有关资料,回答有关遗传、基因工程问题。(13分)
油菜的株高由等位基因 G 和 g 决定,GG 为高杆,Gg 为中杆,gg 为矮杆。B基因是另一种植物的高杆基因,B 基因与 G 基因在油菜的株高上有相同的效果,并且株高与这两个基因的数量正相关。下图是培育转基因油菜的操作流程。请回答下列问题:
(1)步骤①中用到的工具酶是
,培育转基因油菜主要运用了转基因技术和
技术。
(2)图中质粒是双链闭合环状的DNA分子,若用两种识别切割序列完全不同的限制酶M和N切割,通过凝胶电泳分离分析得下表。限制酶M和N的识别序列和切割位点如图甲所示。
①该质粒的长度为___________kb。在该质粒中,M酶与N酶的切割位点分别有__________、
个。
②M酶与N酶切出的能相互粘连的末端在酶的作用下相互连接,请将连接的结果表示出来:____________。连接后的序列是否可以用M酶、N酶进行切割:_______________。
下图为B基因的结构示意图以及限制酶M和N的切割位点。
③现用图中基因作为目的基因,若采用直接从供体细胞中分离,可选用酶______来切割。
④已知Ⅱ区的碱基数是2000个,其中阴影区域碱基数是800个,空白区域中G和C的总数共有400个,则由该区转录的mRNA中A和U总数是
。
(3)若将一个 B 基因转移到矮杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达,且
B 基因与 g 基因位于非同源染色体上,这样的转基因油菜植株表现型为
。
(4)若将一个 B 基因转移到中杆油菜的染色体上并在植株中得到成功表达,培育了甲~丁四种转基因油菜(如下图)。
①与甲的株高相同的是
。四种转基因油菜分别自交,在不考虑交叉互换的前提下,子代有 3 种表现型的是
。
②另有一种转基因油菜自交子代也有3
种表现型,请在下图中的染色体上标出B 基因的位置。