Question

【题目】英国PPL制药公司通过不同的技术方法获得转基因哺乳动物，让其乳腺系统高效表达人凝血因子IX，以下为技术方法。

方法一：将相关调控组件重组在一起，通过一定的方法导入哺乳动物的受精卵中，然后将受精卵送入母体内，使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后，可通过其分泌的乳汁来生产所需药品。

方法二：用已在小鼠中证明为可高效表达的人凝血因子Ⅸ转基因构件和新霉素抗性基因共转染绵羊胎儿成纤维细胞，得到整合了上述两种基因的成纤维细胞，以其作为核供体，获得转基因绵羊，通过分泌的乳汁来生产所需药品。

回答下列问题：

（1）让羊的乳腺系统通过分泌乳汁来生产所需药品，这称为__________________________。

（2）方法一需要将人凝血因子Ⅸ基因与_________的启动子等调控组件重组在一起，通过____________技术导入哺乳动物的受精卵中。

（3）方法二中新霉素抗性基因的作用是________________，要鉴定该基因转染绵羊胎儿成纤维细胞是否成功需进行的操作是___________________________。用动物的胚胎干细胞作为核供体可进一步提高生产潜能，一般胚胎干细胞的来源是_________________________。

（4）与方法一相比，方法二的优点是__________________________________。

Answer 1

【答案】乳腺（或乳房）生物反应器 乳腺蛋白基因 显微注射 作为标记基因，对重组细胞进行鉴定和筛选 将转染后的绵羊胎儿成纤维细胞放在含有新霉素的选择培养基中进行培养，能正常生长的细胞即为转染成功的 早期胚胎或原始性腺 效率髙（或短时间内获得大量转基因动物）；核供体的细胞保证是整合了某一外源结构基因的细胞，一旦核移植成功，就意味着得到了转基因动物；将转基因动物的筛选提前到细胞水平，而不是在动物（个体）水平

【解析】

基因工程技术的基本步骤：

（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成；

（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等；

（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞；

（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。

（1）通过动物乳腺系统分泌乳汁生产药品称为乳腺生物反应器或乳房生物反应器。

（2）构建基因表达载体需要将目的基因和乳腺蛋白基因的启动子重组在一起，将目的基因导入动物细胞常用显微注射技术。

（3）新霉素抗性基因作为标记基因，对重组细胞进行鉴定和筛选；鉴定基因转染绵羊胎儿成纤维细胞是否成功可以将转染后的绵羊胎儿成纤维细胞放在含有新霉素的选择培养基中进行培养，能正常生长的细胞即为转染成功的；一般胚胎干细胞来源于早期胚胎或原始性腺。

（4）方法二采用核移植技术，相比方法一效率髙（或短时间内获得大量转基因动物）；核供体的细胞保证是整合了某一外源结构基因的细胞，一旦核移植成功，就意味着得到了转基因动物；将转基因动物的筛选提前到细胞水平，而不是在动物（个体）水平。