Question

正当中国各界激烈争论转基因水稻安全问题之际，在菲律宾首都马尼拉郊外的一片稻田里，一种被称为“金色大米”的转基因水稻已经悄然收获。这种转基因大米可以帮助人们补充每天必需的维生素A。由于含有可以生成维生素A的β一胡萝卜素．它呈现金黄色泽，故称“金色大米”。(摘自20l0年4月<新世纪>周刊) “金色大米”的培育流程如图所示．请回答下列问题。(已知酶I的识别序列和切点是一G ↓ GATCC一．酶II的识别序列和切点是一↓ GATC—)。

(1)图中a、b所示获得目的基因的方法是          ，培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是                   。图中c称作          ，它的构成除了复制原点、目的基因外，还必须有         、          、           等。
(2)据图分析，在构建c的过程中，目的基因用        (限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ)进行了切割。检验重组载体导入能否成功需要利用                        作为标记基因。
(3)过程e运用了细胞工程中的          技术，该技术的理论依据是               ；在该技术应用的过程中，关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行      和            。
(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过      工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。

Answer 1

(除注明外，每空1分，共15分)
(1)反转录法（逆转录合成） 基因表达载体的构建 基因表达载体(或重组质粒，重组DNA分子)   启动子、终止子、标记基因
(2)限制酶Ⅱ（2分） 基因I（2分）
（3）植物组织培养    细胞全能性    脱分化     再分化
（4）蛋白质

解析试题分析：(1)由DNA→mRNA→目的基因为反转录法。基因工程的核心是基因表达载体的构建。图中c为基因表达的载体。作为基因表达的载体必须有启动子、目的基因、标记基因、终止子等。(2) 酶I的识别序列和切点是一G ↓ GATCC一, 酶II的识别序列和切点是一↓ GATC—；由目的基因两端的序列可知应该用限制酶Ⅱ切割。对质粒应该用限制酶Ⅰ切割，不能用限制酶Ⅱ切割，因为用限制酶Ⅱ切割会破坏标记基因Ⅰ和Ⅱ，而用限制酶Ⅰ切割只会破坏标记基因Ⅱ。所以检验重组载体导入能否成功需要利用基因Ⅰ作为标记基因。（3）由含目的基因的水稻细胞培养成转基因植物需用植物组织培养技术。植物组织培养技术的理论依据是植物细胞的全能性。植物组织培养过程包括脱分化和再分化。（4）若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则可通过蛋白质工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计。
考点：本题考查基因工程、蛋白质工程知识，意在考查对知识的识记及理解应用。