Question

【题目】线粒体是与细胞凋亡密切相关的细胞器。为研究蛋白B对家蚕细胞凋亡的影响，科研人员做了如下实验。

（1）细胞色素c是线粒体内膜上的重要电子传递体，参与有氧呼吸第__________阶段的生化反应。细胞受到凋亡信号的作用后，线粒体膜上的非特异性通道打开，引起线粒体膜的性发生改变，线粒体膜两侧离子的分布发生变化，导致线粒体膜电位下降或消失，使得细胞色素c释放出来，引发细胞凋亡。

（2）用生物碱H处理悬浮培养的家蚕细胞，处理不同时间后，用凝胶电泳方法测定细胞溶胶（细胞质基质）中细胞色素c的含量，结果如下图所示。

①由于细胞中微管蛋白的表达量__________，在实验中可作为标准物质，以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和细胞色素c的__________等无关变量对实验结果的影响。

②据图分析，正常细胞的细胞溶胶中__________检测到细胞色素c，由__________判断，随着生物碱H处理时间延长，细胞色素c逐渐释放到细胞溶胶中。

（3）为研究蛋白B的功能，科研人员构建蛋白B基因过量表达载体和蛋白B基因表达干扰载体，导入悬浮培养的家蚕细胞中，用__________处理转基因家蚕细胞，检测到过量表达蛋白B的细胞溶胶中细胞色素c的释放量减少，抑制蛋白B基因表达的细胞溶胶中细胞色素c的释放量显著增加，推测蛋白B______________________________。

Answer 1

【答案】 三 （离子）通透 相对稳定（且丰富） 检测方法 没有（或“未能”） 细胞溶胶中细胞色素c含量增加，分享的线粒体中细胞色素c含量下降 生物碱H 抑制细胞色素c的释放，进而抑制细胞凋亡

【解析】试题分析：本题以为了研究蛋白B对家蚕细胞凋亡的影响，科研人员所作的实验为题材，考查细胞结构和功能、基因工程操作步骤等知识，识记细胞结构和功能、明确基因工程的操作步骤，再结合题意作答。

（1）有氧呼吸第三阶段的场所是线粒体内膜，由细胞色素c是线粒体内膜上的重要电子传递体，可推测细胞色素c参与有氧呼吸第三阶段的生化反应；细胞受到凋亡信号的作用后，线粒体膜上的非特异性通道打开，会引起线粒体膜的（离子）通透性发生改变，线粒体膜两侧离子（和质子）的分布发生变化，导致线粒体膜电位下降或消失，使得细胞色素c 释放出来，引发细胞凋亡。
（2）①在用生物碱H处理悬浮培养的家蚕细胞，处理不同时间后，用凝胶电泳方法测定细胞溶胶（细胞质基质）中细胞色素c的含量的实验中，由于细胞中微管蛋白的表达量相对稳定（且丰富），所以在实验中可作为标准物质，以校准和消除由于细胞培养操作、细胞取样量和细胞色素c的检测方法等无关变量对实验结果的影响。
②分析题图可知，正常细胞的细胞溶胶中没有（或“未能”）检测到细胞色素c，而据细胞溶胶中细胞色素c含量增加，分离的线粒体中细胞色素c含量下降可判断，随着生物碱H处理时间延长，细胞色素c逐渐释放到细胞溶胶中。
（3）为研究蛋白B的功能，科研人员构建蛋白B基因过量表达载体和蛋白B基因表达干扰载体，导人悬浮培养的家蚕细胞中，用生物碱H处理转基因家蚕细胞，检测到过量表达蛋白B的细胞溶胶中细胞色素c的释放量减少，而抑制蛋白B基因表达的细胞溶胶中细胞色素c的释放量会显著增加，据此可推测蛋白B抑制细胞色素c的释放，进而抑制细胞凋亡。