Question

图1是可作为基因载体的质粒，图2是含有目的基因的外源DNA．

（1）若将图1中质粒和图2中含目的基因的外源DNA通过限制酶处理后，进行拼接形成重组质粒，那么最好应选用

 

限制酶．对符合设计要求的重组质粒用SmaⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ三种酶同时进行酶切，假设所用的酶均可将识别位点完全切开，则可得到

 

种DNA片段．
（2）若选用EcoRⅠ处理后，形成重组质粒，经检测，部分含有重组质粒的受体细胞中目的基因不能正确表达，其最可能的原因是

 

．
（3）试管婴儿技术为许多不孕夫妇解决了不育问题，而设计试管婴儿技术必须获得政府部门的相关批准证书，以防该技术的滥用．设计试管婴儿所引发的伦理问题主要是将此技术用于设计婴儿性别及

 

．一般我们所说的试管婴儿技术与设计试管婴儿相比，不必经过

 

这一步骤．我国政府严禁生殖性克隆，不反对治疗性克隆，从胚胎工程的技术手段看，与生殖性克隆相比，治疗性克隆没有经过

 

．
（4）人类要实现可持续发展，必须走生态经济之路，生态经济所遵循的主要原则和实现的重要手段分别是

 

和

 

．在进行林业工程建设时，一方面要号召农民种树，保护环境．另一方面要考虑贫困地区农民的生活问题，如粮食、烧柴以及收入等问题，其体现了生态工程的基本原理是

 

（只填一个）．
（5）在进行生态工程建设时，应当根据当地的实际条件、因地制宜地进行．如小流域存在的主要问题是

 

，针对这种问题我国甘肃陇南地区总结出了“九子登科”的治理模式．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,生态工程依据的生态学原理

专题：

分析：分析图解可知，图1中质粒上存在四个不同的酶切位点，其中SmaⅠ限制酶的酶切位点存在于抗性基因上；图2中目的基因上也有四种限制酶的酶切位点，而SmaⅠ限制酶的酶切位点存在于基因的中间，因此该酶不可取．
如果利用EcoRⅠ一种限制酶构建基因表达载体，可能导致目的基因和质粒反向连接，因此一般选择两种限制酶进行切割，如图中的EcoRⅠ和HindⅢ，它们切割后可以保证目的基因和质粒定向连接．

解答： 解：（1）根据不同限制酶在目的基因和质粒上的识别位点，可知①不能用SmaⅠ切割，因为用该酶切割后将导致目的基因被破坏，②也不能用SnaBⅠ和BamHⅠ切割，因为这两种酶的酶切位点没有同时出现在质粒和目的基因，③也不能用EcoRⅠ一种酶来切割，因为切割之后形成的片段易发生自身环化现象．故只能用EcoRⅠ和HindⅢ两种酶同时切割．用EcoRⅠ和HindⅢ两种酶切割后经重组形成的符合要求的重组质粒上含有2个SmaⅠ、1个EcoRⅠ、1个HindⅢ识别位点，经SmaⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ三种酶同时进行酶切，该环状DNA分子将被切割成4种小的DNA片段．
（2）若用EcoRⅠ处理，因为同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因与质粒反向连接，故导致部分含有重组质粒的受体细胞中目的基因不能正确表达．
（3）设计试管婴儿所引发的伦理问题主要是将此技术用于设计婴儿性别及不适合的胚胎处理问题．一般情况下试管婴儿技术与设计试管婴儿相比，不必经过遗传学诊断这一步骤．从胚胎工程的技术手段看，与生殖性克隆相比，治疗性克隆没有经过胚胎移植这一环节．
（4）生态经济所遵循的主要原则是循环经济，而实现这一目标的重要手段是生态工程．在进行生态工程建设时，如同时兼顾社会--经济--自然，则遵循整体性原理．
（5）在进行生态工程建设时，应当根据当地的实际条件、因地制宜地进行．如小流域存在的主要问题是水土流失比较严重．
故答案为：
（1）EcoRⅠ和HindⅢ4
（2）同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因与质粒反向连接
（3）不适合的胚胎处理问题       基因检测（遗传学诊断）   胚胎移植
（4）循环经济         生态工程        整体性原理
（5）水土流失比较严重

点评：本题考查基因工程、胚胎工程和生态工程的相关知识，要求考生具有一定的识图能力、理解能力，并明确同种限制酶切割形成的相同黏性末端会发生反向连接；掌握生态工程的原理等知识．