Question

【题目】土壤有“微生物的天然培养基”之称。下图是某同学分离和培养土壤中微生物的部分操作步骤和实验结果示意图。回答下列问题：

（1）利用固体培养基培养土壤中的微生物时，除考虑各种营养条件外，还需要控制的培养条件有_____（至少写两点）等。接种前应该先检测固体培养基是否被污染，检测的具体方法是_____。

（2）图示中用平板划线法接种的操作顺序是A→B→_____；以上操作步骤中存在明显错误的是_____（用字母表示），该操作的正确方法是_____。

（3）实验室利用平板划线法来分离样品中的目的菌时，每次划线之前都要对接种环进行灭菌，目的是_____。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是_____。

Answer 1

【答案】温度、pH、氧气、无菌等 将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生 E→D→C→F C 在酒精灯的火焰旁划线 杀灭上次划线接种环上残留的菌种 使菌种的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终能够得到单菌落

【解析】

据图图示为平板划线操作：①挑取土壤含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。②划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁，左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁），右手拿接种环先在A区划3﹣4条连续的平行线（线条多少应依挑菌量的多少面定）。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方（不要放入皿盖内），以防止杂菌的污染。③划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。④等平板凝固后，将平板倒置。因此，正确的顺序为A→B→E→D→C→F。

（1）若用该培养基培养土壤中的微生物时，除考虑各种营养条件外，还要考虑温度、pH、氧气、无菌等和渗透压等条件。检测固体培养基是否被污染的方法是：将未接种的培养基在适宜的环境中放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生。

（2）图示是平板划线法接种操作示意图，由以上分析可知，其操作顺序是A→B→E→D→C→F；为了防止杂菌污染，接种应该在酒精灯的火焰旁进行，因此以上操作中存在错误的步骤是C

（3）平板划线法操作时，次划线之前都要对接种环进行灭菌，目的是杀灭上次划线接种环上残留的菌种。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，能够使菌种的数目随着划线次数的增加而逐渐减少，最终能够得到单菌落