Question

17．下列对基因工程的四大操作步骤的理解有错误的一项是（　　）

• A． 限制性核酸内切酶主要存在于微生物体内，识别序列具有特异性
• B． DNA连接酶是作用于断裂开的两个脱氧核苷酸之间的化学键
• C． 运载体和目的基因之间的连接必须要暴露出相同的黏性末端
• D． 在目的基因的检测与表达过程只能使用含青霉素的选择培养基

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、限制性核酸内切酶主要存在于微生物体内，识别序列具有特异性，A正确；
B、DNA连接酶是作用于断裂开的两个脱氧核苷酸之间的化学键，即磷酸二酯键，B正确；
C、运载体和目的基因之间的连接必须要暴露出相同的黏性末端，这样DNA连接酶才能将两者连接起来，C正确；
D、标记基因不一定是青霉素抗性基因，因此在目的基因的检测与表达过程不一定要使用含青霉素的选择培养基，D错误．
故选：D．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确判断各选项．