Question

【题目】为了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA，科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞，并与蛋白质形成复合物）、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA，使蛋白质变性）、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果，主要实验步骤和相关检测结果如下，其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答：

结果检测

注:①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0，过低表明小分子物质残留较多；②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8，若比值大于1.8表示存在RNA残留，若小于1.8表示存在蛋白质残留。③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。

（1）步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是_____________。步骤④“? ”表示___________。

步骤⑤中加RNA酶的作用是_______________。

（2）影响DNA纯度的物质主要有______________。提取的DNA中RNA残留较多的方法是______________。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高，原因是______________。

（3）电泳可以直观对比DNA的完整性，分子大小不同的DNA在凝胶上迁移速率不同，从而产生不同的条带。下图是上述实验中提取到的总DNA 凝胶电泳结果，其中M是已知大小的不同DNA的混合物。实验结果显示A、B方法提取的总DNA电泳结果只有一条带，而C方法有明显的“拖尾”现象。

①只出现一条带的原因是______________。

②出现“拖尾”现象的原因是______________。

Answer 1

【答案】 使蛋白质变性 上清液 水解RNA，去除RNA杂质 蛋白质、RNA、小分子物质 A方法 细胞分裂旺盛 甜菜细胞基因组DNA分子都比较大，不容易分离 DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段

【解析】试题分析：本题考查DNA的粗提取与鉴定，考查对DNA粗提取方法的理解与识记，考查表格数据的分析能力。

（1）65℃水浴保温60min的目的是使蛋白质变性。氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，离心后应取上清液。步骤⑤中加RNA酶的作用是水解RNA，去除RNA杂质。

（2）提取的DNA中可能混有蛋白质、RNA、小分子物质。A方法提取的DNA OD260/OD280大于1.8，表示RNA残留较多。嫩叶细胞分裂旺盛，以嫩叶为材料提取DNA的得率较高。

（3）据图可知，DNA分子越大，迁移距离越短。①只出现一条带的原因是甜菜细胞基因组DNA分子都比较大，不容易分离。②出现“拖尾”现象的原因是C方法导致DNA发生断裂或降解，形成许多大小不等的DNA片段。