Question

【题目】分离筛选降解纤维素能力强的微生物对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有理论和实际意义。研究人员从土壤和腐烂的秸秆中分离筛选出能高效降解纤维素的菌株，并对筛选出的菌株进行了初步研究。

（1）对培养基进行灭菌的常用方法是 。为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用 法进行接种。

（2） 先将样品悬液稀释后涂在放有滤纸条的固体培养基上进行筛选得到初筛菌株。再将初筛菌株接种到以 为唯一碳源的培养基培养2～5天，加入 溶液后，依据出现的颜色反应进行筛选，观察菌落特征并测量 。同时将初筛菌株制备成的菌液放入加有滤纸条的液体培养基中，恒温振荡培养8天，观察滤纸条的破损情况。结果见表。由表可知，8种菌株中1、3、7号菌株产酶能力较强,原因是 。

注: ① DP = （D / d） 2，其中d表示菌落直径（cm） ，D表示水解圈直径（cm）

②“+”为滤纸边缘膨胀， “+ + ”为滤纸整齐膨胀并弯曲，“+ + + ”为滤纸不定形“+ + + +”为成团糊状“+ + + + +” 为半清状

（3） 为进一步研究1、3、7号菌株对秸秆降解的效果。分别用这三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定。结果见下图。

由图分析可知，三种菌株对 的降解最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中 的降解率变化最大。整体分析 号菌株的降解效果最好。

Answer 1

【答案】

（1）高压蒸汽灭菌 平板划线

（2）纤维素 刚果红 透明圈直径与菌落直径 此三种菌株透明圈直径与菌落直径的比都较高,且滤纸片破损程度高

（3）半纤维素 纤维素 7

【解析】

（1）对培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。形成单个菌落可以用平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线法应用的是接种环，稀释涂布平板法用的是涂布器，故是平板划线法。

（2）要筛选降解纤维素的细菌，所以应以纤维素为唯一碳源，同时用刚果红染色法。因为刚果红可以和纤维素这样的多糖形成红色络合物，而和纤维二糖和单糖不会，所以出现透明圈后可以确定有纤维素分解菌。透明圈和菌落直径直径越大，说明降解效果越好。因为1,3,7号菌株透明圈直径与菌落直径的比都较高,且滤纸片破损程度高，所以它们的降解效果好。

（4）由图可知三种菌株对半纤维素的降解能力最强，与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中纤维素的降解率变化最大，由原来的较低到50%左右。整体分析，数7号菌株的降解率最高，所以效果最好。

土壤中分解尿素的细菌	分解纤维素的微生物
①选择培养基的成分：尿素作为唯一的氮源 ②鉴定方法：在培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变红，pH升高，说明细菌能分解尿素	①选择培养基的成分：纤维素作为唯一的碳源 ②鉴定方法：刚果红染色法，即刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，培养基出现以纤维素分解菌为中心的透明圈