Question

10．利用紫外线诱变选育高产β-胡萝卜素的三孢布拉霉负菌（单细胞真菌），未突变菌不能在含有浓度为10^-5M的β-紫罗酮的培养基上生长．菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色．图甲为选育及提取获得β-胡萝卜素流程．

（1）三孢布拉霉负菌与细菌共同具有的细胞器是核糖体．从真菌细胞中提取酶时，常常采用凝胶色谱法将相对分子质量不同的酶进行分离．
（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源；为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10^-5M的β━紫罗酮．
（3）进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β-胡萝卜素产量高的菌种，采取重复③④（填图甲中数字）过程．
（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示．该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性．
（5）过程⑥是浓缩，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量过少，提取的色素少．
（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是①制备MS培养基；②_外植体消毒；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培．

Answer 1

分析 阅读题干和题图可知，本题是利用紫外线诱变选育高产β━胡萝卜素的三孢布拉霉负菌菌种的分离和培养过程，明确知识点，梳理相关的基础知识，分析题图，结合问题的具体提示综合作答．

解答 解：（1）三孢布拉霉负菌为真核细胞，细菌为原核细胞，它们共同具有的细胞器是核糖体．从真菌细胞中提取酶时，常常采用凝胶色谱法将相对分子质量不同的酶进行分离．
（2）培养基中的葡萄糖为菌体生长提供碳源（碳源和能源）；由于未突变菌不能在含有浓度为10^-5M的β━紫罗酮的培养基上生长，所以为选出高产突变菌种，还应在培养基中添加10^-5M的β━紫罗酮．该培养基按用途分属于选择培养基．
（3）菌体随β━胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行③过程时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基．为筛选纯化β━胡萝卜素产量高的菌种，采取重复③④过程．
（4）固体平板培养基经过程②接种培养后的菌落分布如图乙所示，所以该同学的接种方法是稀释涂布平板法；只有少数菌能生长形成菌落的根本原因是基因突变频率低和不定向性，只有少数基因突变的菌才能生长、繁殖．
（5）过程⑥是浓缩，用纸层析法鉴定提取的胡萝卜素粗品，结果发现颜色较浅，导致该现象的原因可能是萃取时，萃取剂使用量过少，提取的色素少．
（6）选取胡萝卜韧皮部细胞进行植物组织培养时，其操作步骤是：①制备MS培养基；②外植体消毒；③接种；④培养；⑤移栽；⑥栽培．
故答案为：（1）核糖体   凝胶色谱
（2）碳源     10^-5M的β━紫罗酮
（3）橙红        ③④
（4）稀释涂布平板法  基因突变频率低和不定向性
（5）浓缩   过少
（6）外植体消毒

点评 本题的知识点是选择培养基的选择作用，分离、纯化菌种的方法和扩大培养的方法；主要考查学生对实验的分析和判断能力．