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    【题目】（下面是将乙肝病毒表面主蛋白基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程图。巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母，能将甲醇作为其唯一碳源。该酵母菌体内无天然质粒，科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。已知当甲醇作为唯一碳源时，该酵母菌中AOX1基因受到诱导而表达（5A0X1和3AOX1（TT）分别是基因AOX1的启动子和终止子）。请分析回答：

    （1）为实现HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该选择______切割质粒，并在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______，这样设计的优点是______。

    （2）酶切获取HBsAg基因后，需用______将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取______。

    （3）步骤3中应选用限制酶______来切割重组质粒以获得重组DNA，然后再将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

    （4）为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入______以便筛选；若要检测转化后的细胞中是否含有HBsAg基因转录产物，可以用______方法进行检测。

    （5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入______以维持其生活，同时诱导HBSAg基因表达。

    【答案】SnaB I、Avr Ⅱ 相应的限制酶识别序列 确保定向连接（避免质粒和目的基因自身环化及自连） DNA连接酶 大量重组质粒 BgIⅡ 卡拉霉素 分子杂交 甲醇

    【解析】

    分析题图该题考查基因工程的基本操作程序，结合题图及题干信息，综合运用所学知识逐项作答。

    （1）分析题图：SnaB、AvrⅡ、BglⅡ和SacI限制酶切割位点，其中SacI位于启动子上，BglⅡ位于终止子上。为实现HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，只能用限制酶SnaB和AvrⅡ切割质粒，并在HBsAg基因两侧的A和B位置接上相应的限制酶识别序列，这样设计的优点是确保定向连接（避免质粒和目的基因自身环化及自连）。

    （2）酶切获取HBsAg基因后，需用DNA连接酶将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取大量重组质粒。

    （3）结合（1），步骤3中应选用限制酶BgIⅡ来切割重组质粒以获得重组DNA，然后再将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

    （4）5′AOX1--3′AOX1段基因含有卡拉霉素抗性基因，为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选；若要检测转化后的细胞中是否含有HBsAg基因转录产物，可以用分子杂交方法进行检测。

    （5）转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入甲醇以维持其生活，同时诱导HBSAg基因表达。

    练习册系列答案
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    【题目】下图表示动物细胞中重要有机物A、B、C、D、E的元素组成及相互关系，其中X、Y代表某些化学元素，a、b、c分别为A、B、C的单体。据图回答：

    （1）Y代表的元素为______。

    （2）D所代表的具有参与血液中脂质运输作用的物质名称是__________；构成生物膜支架的E的合成场所主要是_________。

    （3）图中能携带遗传信息的物质名称是___________。

    （4）某C物质由n个c组成且仅为一条链，其分子式为CmHpNqOwS2，并且是由下列4种c组成的，那么该物质彻底水解后将会得到丙数目为_________。

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    【题目】下图为某动物体内细胞分裂的一组图像，下列叙述错误的是（ ）

    A.细胞①中含有8条染色体

    B.细胞①、②、③、⑤产生的子细胞中均有同源染色体

    C.上图中表示有丝分裂的细胞及其分裂顺序是⑤→③→①

    D.细胞④分裂形成精细胞

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    【题目】图为某物质的合成与分泌过程示意图，甲、乙、丙、丁、戊表示细胞结构。其中甲、戊中含有RNA。下列说法中不正确的是(　　)

    A. 图示过程可体现生物膜系统在结构和功能上的相互联系

    B. 图示过程的实现与生物膜上的脂质分子、蛋白质分子的运动有关

    C. 在图中戊结构内，丙酮酸氧化分解产生CO2的阶段没有O2参加

    D. X的分泌过程能发生在无甲、乙、丙、丁、戊等结构的原核细胞中

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】如图1所示的甲、乙、丙三个渗透装置中，三个漏斗颈的内径相等，漏斗内盛有浓度相同的蔗糖浓液，且漏斗内液面高度相同，漏斗口均封以半透膜，置于同一个水槽的清水中。三个渗透装置的半透膜的面积和所盛蔗糖溶液的体积不同，如下表所示。

    装置编号

    甲

    乙

    丙

    半透膜面积

    S

    S/2

    S

    蔗糖溶液体积

    T

    T

    2T

    图2中曲线1、2、3表示漏斗液面高度随时间的变化情况。则曲线1、2、3与甲、乙、丙三个装置的对应关系是 (　　)

    A. 1－丙；2－甲；3－乙 B. 1－乙；2－甲；3－丙

    C. 1－甲；2－乙；3－丙 D. 1－丙；2－乙；3－甲

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    【题目】1952年，赫尔希和蔡斯利用同位素标记法，完成了著名的噬菌体侵染细菌的实验，实验包括4个步骤：①分别用噬菌体侵染细菌；②用35S和32P分别标记噬菌体；③进行放射性检测；④培养液搅拌后离心分离。回答有关问题。

    （1）该实验步骤的正确顺序是_____。

    A．①②④③ B．④②①③ C．②①④③ D．②①③④

    （2）下图中锥形瓶内的培养液是用来直接培养_____的，其内的营养成分中能否含有32P? _____

    （注：图中A和C中的方框代表大肠杆菌）

    （3）要让放射性同位素主要分布在图中离心管的上清液中，则获得该实验中的噬菌体的培养方法是______。

    A．用含35S的培养基直接培养噬菌体

    B．用含32P的培养基直接培养噬菌体

    C．用含35S的培养基细菌，在用此细菌培养噬菌体

    D．用含32p的培养基细菌，在用此细菌培养噬菌体

    （4）连续培养噬菌体n代，则含亲代噬菌体DNA的个数应占总数的_____

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    【题目】五个大小相同的马铃薯幼根与物种A的幼根分别放入甲—戊五种不同浓度的蔗糖溶液中，数小时后，取出称重，重量变化如图所示。以下关于该实验结果的说法不正确的是

    A.与马铃薯幼根细胞液等渗的溶液是甲溶液

    B.马铃薯比物种A更耐旱

    C.物种A幼根的细胞在甲浓度溶液中一定会发生明显的质壁分离

    D.在这五种蔗糖溶液中，浓度最大的是乙溶液

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    【题目】如图甲、乙、丙是某高等动物体内发生的细胞分裂模式图，图丁为某一时刻部分染色体行为的示意图，在无基因突变的情况下，下列说法正确的是（）

    A. 若丁发生在丙细胞形成的过程中，最终产生的子细胞基因组成有2种或4种

    B. 若A基因在图甲中的1号染色体上，则a基因在4号和8号染色体上

    C. 由于同源染色体分开，非同源染色体自由组合，乙细胞可分裂产生两种子细胞

    D. 若丁图表示发生在减数第一次分裂的四分体时期，则①和②都发生了染色体变异

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    【题目】牛奶是日常生活中经常食用的乳制品，对人体健康有很大好处。环保科技兴趣小组从某牛奶厂排污口获取水样，希望从中筛选出能高效降解蛋白质的细菌。据有关知识回答下列问题。

    (1)对牛奶进行消毒常用的方法是_________，其优点是________________。

    (2)为实现筛选目的，该兴趣小组使用了如下配方的培养液。

    在配制培养液时________(填“能”或“不能”)将该配方中的蛋白质换成葡萄糖，原因是_______。

    (3)为实现目的菌株的分离和计数，应在该配方中加入______________，制成平板，常用的接种方法是_________________。为检测所使用的平板灭菌是否彻底或是否被污染，操作方法是_________。

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