Question

【题目】[生物——选修3：现代生物科技专题]家蚕细胞具有高效表达外源基因的能力，科学家将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。请回答下列相关问题：

（1）进行转基因操作前，需用_________酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞。在培养动物细胞时，培养液中需要通入CO2，作用是_________。

（2）为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的_________和___________之间。

（3）采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水，4种脱氧核苷酸、模板DNA、能量、____和______。

（4）利用生物反应器培养家蚕细胞时，贴满瓶壁的细胞会产生________现象。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大_________，从而增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶（或胶原蛋白酶） 维持pH值的稳定 启动子 终止子 TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶） 引物 接触抑制 增大细胞贴壁生长的附着面积

【解析】试题分析：梳理动物细胞培养、基因工程的相关知识，从题意中提取有效信息，进行相关问题的解答。

(1)为使动物组织分散开，获得单个细胞，通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。在培养动物细胞过程中，培养液中通入的CO2的作用是：维持pH值的稳定。

(2)启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端 ，因此在构建基因表达载体时，需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的启动子和 终止子之间。

(3) 采用PCR技术扩增目的基因时，PCR反应体系的主要成分应该包含：扩增缓冲液（含Mg2+）、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA、能量、TaqDNA聚合酶（热稳定DNA聚合酶）和引物。

(4) 动物细胞离体培养时，贴满瓶壁的细胞会产生接触抑制现象。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中，这样可以增大细胞贴壁生长的附着面积，从而增加培养的细胞数量，也有利于空气交换。