Question

回答下列关于基因工程的问题：

如图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”示意图，所用载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒A导入细菌B后，其上的基因能得到表达，根据图示所给信息回答下列问题：

(1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒时，用同一种限制性内切酶分别切割目的基因和质粒，露出相同的黏性末端，将切下的目的基因片段插入质粒的切口处再加入适量的             ，使质粒与目的基因结合成重组质粒。

(2)目前把重组质粒导入细菌细胞时，效率还不高；导入完成后得到的细菌，实际上有的根本没有导入质粒；有的导入的是普通质粒A；只有少数导入的是重组质粒。此处可以通过如下步骤来鉴别得到的细菌是否导入了质粒A或重组质粒：

将得到的细菌涂抹在一个含有                的培养基上，能够生长的就是导入质粒A或重组质粒的，反之则没有。此过程中体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件                      ；                                            。

(3)若进一步鉴定证明细菌中导入的是普通质粒A还是重组质粒，将得到的细菌涂抹在一个含有

                的培养基上培养，若细菌                ，则导入的是普通质粒。如果利用DNA分子杂交原理来证明此过程，应该用                                    作为探针。

（4）使体外重组的DNA分子转移到受体细胞内，主要是借鉴                        的途径。

(5) 目的基因表达成功后，“工程菌”明显不同于细菌D。从变异的来源看，此变异属于         

       。导入细菌B细胞中的目的基因成功表达的标志是什么?                    。

Answer 1

（1）DNA连接酶     

（2）氨苄青霉素    具有标记基因      能在宿主细胞内复制并稳定的保存    

（3）四环素   能生长      放射性同位素（或荧光分子）标记的胰岛素基因  

（4）细菌或病毒侵染细胞

（5）基因重组        受体细胞通过转录和翻译过程合成出相应的蛋白质（生长激素）

解析:

考查基因工程的知识。

（1）连接目的基因和质粒切口的酶是DNA连接酶。

（2）检测目的基因是否导入可通过检测标记基因表达产物。

（3）检测导入的是普通质粒还是重组质粒，可通过目的基因插入的位置（四环素抗性基因）检测。

（4）重组DNA分子导入受体细胞通过病毒感染细胞方法。

（5）基因工程引起变异的来源是基因重组，目的基因成功表达的标志是目的基因控制合成的蛋白质（生长激素）合成。