Question

【题目】研究表明，HER2/neu是一种原癌基因，它表达的H蛋白在多种恶性 肿瘤特别是乳腺癌细胞中过量表达。抗H蛋白单克隆抗体能抑制过量表达H蛋白的乳腺癌细胞的生长，目前已成为有效的生物治疗手段。

(1)选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点，是因为H蛋白在成年个体的正常组织中________(填“低表达”或“高表达”)。H蛋白是一个跨膜蛋白，结构如图所示。制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建________区基因，转入原核细胞表达并提纯。

(2)将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与________细胞进行融合，使用的化学诱导剂是________，细胞融合的原理是________。

(3)将融合细胞在________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用抗原抗体杂交技术进行_________检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(4)治疗乳腺癌时，可单独使用抗H蛋白单克隆抗体，也可将该单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，杀死癌细胞。这充分体现了单克隆抗体________________的特点。

Answer 1

【答案】 低表达 胞外 骨髓瘤 PEG(或“聚乙二醇”) 细胞膜的流动性 选择 抗体阳性 特异性强(或“识别抗原部位专一”)

【解析】试题分析：本题考查单克隆抗体技术，考查对单克隆抗体制备流程的理解和识记。解答此题，应明确单克隆抗体的制备原理和单克隆抗体的优点。

(1) H蛋白在多种恶性肿瘤中过量表达，在成年个体的正常组织中低表达，因此看选择H蛋白作为单克隆抗体的作用靶点。H蛋白的胞外部分可被免疫系统识别，制备免疫小鼠用的H蛋白(抗原)时，应构建胞外区基因，转入原核细胞表达并提纯。

(2)将H蛋白注射到小鼠体内，取该小鼠的脾脏细胞与骨髓瘤细胞进行融合，使用PEG(或“聚乙二醇”)进行化学诱导融合，细胞融合依赖于细胞膜的流动性。

(3)将融合细胞在选择培养基中培养，可筛选出杂交瘤细胞。将杂交瘤细胞转到多孔培养板上培养，应用抗原抗体杂交技术进行抗体阳性检测。经多次筛选，就能得到产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。

(4)治疗乳腺癌时，使用抗H蛋白单克隆抗体与抗癌药物结合构建“生物导弹”，定向杀死癌细胞，这充分体现了单克隆抗体特异性强(或“识别抗原部位专一”)的特点。