【题目】CTB是霍乱弧菌产生的肠毒素(蛋白质)结构的一部分,可用作针对霍乱弧菌的疫苗.研究人员提取了控制CTB合成的基因(ctb),构建基因表达载体(如图所示),将其导入番茄,然后用转基因番茄饲喂试验小鼠,检测疫苗的有效性.请回答相关问题:
(1)为了在短时间内获得大量基因,可以采用技术.与细胞内DNA复制时的解旋过程相比,该技术的DNA解链过程有何不同?(写出一点即可.)
(2)使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来,原因是 .
(3)可采用方法将基因表达载体导人番茄细胞,然后在加入了的培养基中进行初步筛选,之后还需用方法检测ctb基因是否整合到番茄染色体的DNA上.
(4)提取转基因番茄不同部位的蛋白质进行检测,发现只有果实中含有CTB.ctb基因只能在果实细胞中表达,这与基因表达载体中的有关.
(5)用转基因番茄果实饲喂试验小鼠,若能在小鼠的血清中检测到 , 则说明该转基因疫苗是有效的.
【答案】
(1)PCR;不需要解旋酶
(2)两种限制酶切割载体可以产生不同的末端
(3)农杆菌转化法;卡那霉素;DNA分子杂交
(4)E8启动子
(5)CTB抗体
【解析】解:(1)PCR技术可在体外大量扩增目的基因;与细胞内DNA复制时的解旋过程相比,该技术的DNA解链过程不需要解旋酶,通过高温变性来实现解旋.(2)两种限制酶切割载体可以产生不同的末端,因此使用两种限制酶切割载体可防止切开的载体的两个末端重新连接起来.(3)将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法;由图可知,标记基因是卡那霉素抗性基因,因此在加入卡那霉素的培养基中进行初步筛选;检测目的基因是否导入受体细胞常用DNA分子杂交技术.(4)ctb基因只能在果实细胞中表达,这与基因表达载体中的E8启动子有关.(5)转基因疫苗若是有效的,则会表达产生CTB,CTB能引起机体发生免疫反应产生相应的抗体,即CTB抗体. 故答案为:(1)PCR 不需要解旋酶(2)两种限制酶切割载体可以产生不同的末端(3)农杆菌转化法 卡那霉素 DNA分子杂交(4)E8启动子 (5)CTB抗体
基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成.(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等.(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法.(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测:①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因﹣﹣DNA分子杂交技术;②检测目的基因是否转录出了mRNA﹣﹣分子杂交技术;③检测目的基因是否翻译成蛋白质﹣﹣抗原﹣抗体杂交技术.个体水平上的鉴定:抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等.
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【题目】甲、乙两支洁净的试管,分别注入3mL淀粉糊,然后在甲试管中注入2mL新鲜的小麦淀粉酶滤液,在乙试管中注入2mL清水。振荡两支试管,将其下半部浸在35℃左右的温水中,约5min,然后同时取出两试管,分别滴入1滴碘液。如图所示,请回答:
(1)两试管中的现象是:甲_____________________;乙__________________。
(2)该实验证明了酶的____________作用,酶之所以具有这样的作用是因为___________。
(3)实验过程为什么要恒温35℃?________________。
(4)几位同学在探索pH对α-淀粉酶活性的影响时,设计的实验方案如下。其中操作顺序最合理的是(_______)
①在三个试管中各加入可溶性淀粉溶液2mL
②在三个试管中各加入新鲜的α-淀粉酶溶液1mL
③置于适宜温度下保温5min
④分别置于100℃、60℃、0℃环境中保温5min
⑤加入斐林试剂后,水浴加热,观察现象
⑥将试管中溶液的pH分别调到3、7、11,保持5min
A.①④②③⑤ B.①⑥④②⑤ C.①②⑥③⑤ D.②⑥①③⑤
(5)与无机催化剂相比,酶具有的特性是:_________;_________;______。
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【题目】一杂合植物(Ee)自交时,E对e完全显性,含有e基因的花粉有50%的死亡率,则自交后代的表现型比例是
A. 2:1 B. 3:1 C. 5:1 D. 1:1
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【题目】为了研究两个小麦新品种P1、P2的光合作用特性,研究人员分别测定了新品种与原种(对照)叶片的净光合速率,结果如图所示.以下说法错误的是( )
A.实验过程中光照强度和CO2初始浓度必须一致
B.可用单位时间内进入叶绿体的CO2量表示净光合速率
C.每组实验应重复多次,所得数据取平均值
D.三个品种达到最大净光合速率时的温度没有显著差异
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【题目】下图是在透明的容器B中放入湿润的种子来验证呼吸作用产生二氧化碳的实验装置。以下说法中错误的是
A. 该装置一定要放在黑暗的环境中,避免光下光合作用的干扰
B. 设置A装置的目的是为了除去空气中的C02,确保实验的科学性
C. 温度会影响呼吸作用的强度,所以要在适宜的温度条件下进行实验
D. C瓶中澄清石灰水变浑浊,是种子进行呼吸作用产生了C02的缘故
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【题目】图1表示物质扩散的图解,图2是设计证明图1物质扩散成立的实验装置,下列有关叙述中正确的是( )
A.图甲中水柱a将持续上升
B.图甲中水柱a将先上升后下降
C.图乙中水柱b将持续上升
D.图乙中水柱b将先上升后下降
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【题目】下列甲图为真核细胞呼吸作用示意图,乙图为线粒体结构模式图。请据图回答:
(1)甲图中X和D代表的物质分别是___________、___________,X产生场所是____________。
(2)甲图A、C过程中产生能量最多的是第______阶段,此阶段发生的场所对应于乙图中的_____(填序号)。
(3)酵母菌在氧气充足条件下的细胞呼吸反应式为______________________________。
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【题目】下列有关细胞核的说法正确的是
A.核仁与细胞中含量最多的有机化合物的合成有关
B.DNA分子可以穿过核膜进人细胞质
C.所有的细胞都只有一个细胞核
D.因为细胞核是遗传信息库,而细茵无细胞核,所以细菌无遗传信息
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