Question

8．为获得高效降低胆固醇的乳酸菌，科研人员作了如下实验．
（1）取适量发酵酸肉，剪碎并研磨，磨碎后加入无菌水制成1：10稀释液，再梯度稀释到10^-6的稀释液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸细菌培养基（MRS 培养基）平板上，在无氧条件下恒温静置培养48小时．挑取具有溶钙圈（或“透明圈”）的菌落，用划线法接种在MRS培养基上纯化．可通过观察菌落的形态、大小判断是否达到了纯化．
（2）纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定上清液中胆固醇的含量，以未接种的高胆固醇培养液作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株．

Answer 1

分析 筛选与分离微生物常用的接种方法主要有稀释涂布平板法和平板划线法．观察菌落特征可以区分不同的微生物．回顾和梳理稀释涂布平板法和微生物培养的相关知识，认真分析即可正确作答．

解答 解：（1）根据题意可知，需要将取出的含有乳酸菌的菌株剪碎并研磨，磨碎后加入无菌水制成1：10稀释液，再梯度稀释到10^-6的稀释液，涂布于添加了CaCO₃的乳酸细菌培养基（MRS 培养基）平板上，由于乳酸菌是厌氧微生物，所以需要在无氧条件下下恒温静置培养48小时．挑取具有溶钙圈（或“透明圈）的菌落，用平板划线法接种在MRS培养基上纯化．可通过观察菌落的形态、大小来判断是否达到了纯化．
（2）胆固醇属于脂质，密度较小，存在于上清液中，所以纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养，一段时间后离心测定上清液中胆固醇的含量，以未接种的高胆固醇培养液作为对照，测定菌株降胆固醇的能力，筛选出目的菌株．
故答案为：
（1）无菌水   无氧   溶钙圈（或“透明圈”）   划线   形态、大小
（2）上清液   未接种的高胆固醇培养液

点评 本题主要考查微生物的分离接种方法与微生物的培养基鉴定等知识，意在强化学生对相关知识的识记、理解与运用．