Question

【题目】白细胞介素是一类淋巴因子。研究人员将人白细胞介素的基因导入到酵母菌细胞中，使其分泌出有活性的白细胞介素。

（1）为增加白细胞介素基因的数量，可使用___________________技术，但前提是必须知道该基因的部

分核苷酸序列，以便根据这一序列合成_________________。

（2）为便于鉴别受体细胞中是否含有外源基因，携带外源基因的质粒上应有___________，还应有____________________，以利于外源基因的表达。

（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用_____________处理酵母菌细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为_________。在表达过程中，启动子需与____________________识别和结合，从而驱动转录过程。

（4）为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而使用酵母菌细胞作为受体细胞，可能原因是_____________________。

Answer 1

【答案】 PCR 设计引物 标记基因 启动子和终止子 Ca2+ 转化 RNA聚合酶 细菌细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器

【解析】试题分析：分析题图，图示表示基因表达载体的构建过程，载体和目的基因都有限制酶EcoRⅠ与EcoR52的切割位点，所以切割载体和目的基因时用限制酶EcoRⅠ与EcoR52，再用DNA连接酶连接目的基因和运载体形成重组载体。

（1）基因工程中，常用PCR技术扩增目的基因，但前提是必须知道基因的已知序列，以便设计引物。

（2）基因表达载体上的标记基因可以用于是否导入目的基因的检测；此外还应该有启动子和终止子，以便外源基因的表达。

（3）在重组载体导入酵母菌细胞之前，需用Ca2+处理酵母菌，使酵母菌称为感受态细胞，白细胞介素基因进入酵母菌细胞内，并且在其细胞内维持稳定和表达的过程，称为转化。在表达过程中，启动子需与RNA聚合酶识别和结合，从而驱动转录过程。

（4）由于细菌属于原核生物，细胞中无内质网和高尔基体等加工白细胞介素的细胞器，因此为了能成功表达出白细胞介素，不使用细菌，而应该使用酵母细胞作为受体细胞。