Question

10．下列基因工程操作步骤中，未发生碱基互补配对的是（　　）

• A． 基因表达载体的构建
• B． PCR技术获得目的基因
• C． DNA分子杂交技术
• D． 抗原抗体杂交技术

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、构建基因表达载体时，目的基因与运载体的结合，黏性末端重组需要遵循碱基互补配对原则，A错误；
B、PCR技术的原理是DNA复制，因此用PCR扩增抗病毒基因时遵循碱基互补配对原则，B错误；
C、DNA分子杂交技术遵循碱基互补配对原则，C错误；
D、抗原抗体杂交技术利用蛋白质与抗原特异性结合，不涉及碱基互补配对，D正确．
故选：D．

点评 本题比较基础，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的基本操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能根据题干要求作出准确的判断，属于考纲识记和理解层次的考查．