[题目]科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统.在检测目的基因导入成功后.删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因.其技术过程如下(图中的■代表基因前的启动子).据图回答下列冋题:(1)loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段.由两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成.自身不会表达.插入质粒后也不影响原有基因的� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

【题目】科学家尝试使用Cre/loxP位点特异性重组系统，在检测目的基因导入成功后，删除转基因烟草细胞内的抗除草剂基因。其技术过程如下（图中的■代表基因前的启动子），据图回答下列冋题：

（1）loxP是一种只有34个碱基对构成的小型DNA片段，由两个13个碱基对反向重复序列和中间间隔的8个碱基对序列共同组成，自身不会表达，插入质粒后也不影响原有基因的表达，其碱基序列如下：

Cre酶能特异性地识别此序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的_______酶。从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的____________。

（2）将重组质粒导入到植物细胞中最常用的方法是___________。作为标记基因，抗除草剂基因用于检测目的基因是否导入成功的原理是___________。

（3）经检测成功后，抗除草剂基因已没有用途，继续留在植物体内可能会造成的安全问题是________。经Cre酶处理后，质粒中的两个loxP序列分别被切开后，可得到如上图右侧的这两个DNA分子。由于_____的原因，抗除草剂基因不再表达，之后会在培养过程中消失。

（4）有关质粒描述错误的是（_____）

A.质粒是能够自我复制的环状DNA分子

B.质粒是唯一的载体

C.质粒上有多个酶切位点

D.质粒可在宿主外单独复制

【答案】限制酶基因重组农杆菌转化法抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上抗除草剂基因可能转移到杂草中抗除草剂基因没有了启动子 BD

【解析】【试题分析】

本题在新的情境下考查了基因工程的相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系，形成知识网络的能力。考生要能排除新情境的干扰，从题目中获取有效的信息，再结合题意梳理所学基础知识，对各小题进行分析作答。

（1）限制酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。Cre酶能特异性地识别图示序列并在箭头处切开loxP，其功能类似于基因工程中的限制酶；从遗传学角度分析，Cre酶改变质粒产生的结果相当于可遗传变异中的基因重组。

（2）将重组质粒导入到植物细胞中的方法有：农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法，其中最常用的方法是农杆菌转化法；由于抗除草剂基因和目的基因在同一个质粒上，故抗除草剂基因可以用于检测目的基因是否导入成功。

（3）抗除草剂基因留在植物体内可能转移到杂草中造成基因污染，进而引起生物安全问题；经Cre酶处理后，由于抗除草剂基因前没有了启动子的原因，抗除草剂基因在受体细胞内不再表达，之后会在培养过程中消失。

（4）质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子，A项正确；在基因工程中使用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒，B项错误；质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段（基因）插入其中，C项正确；质粒只能在细胞中进行自我复制，D项错误。

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