Question

【题目】某转基因抗病植物的培育过程如图1所示，图2表示PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ和ApaⅠ四种限制酶的识别序列及酶切位点。请据图回答下列问题：

（1）图中限制酶切割DNA时破坏的是两个___之间的化学键。

（2）在构建图1中的重组质粒时要保证目的基因被连接在质粒上特定的____和终止子之间才能保证目的基因在受体细胞中被成功_________。

（3）将抗病基因从含抗病基因的DNA中切割下来，使用的限制酶是___，同时也应该用相同的酶对质粒进行切割，这样处理的原因是_______。请写出单独用PstⅠ切割质粒后的片段： ________。

（4）转基因抗病植物的培育是否发生了可遗传变异？________。药物A会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，根据这一原理可以利用含药物A的培养基筛选已导入重组质粒的受体细胞。由此推断，重组质粒中应含有________基因作为标记基因。

Answer 1

【答案】脱氧(核糖)核苷酸 启动子 转录（或者填表达） PstⅠ和EcoRⅠ 用相同的酶切割质粒才能产生与目的基因相同的末端，便于二者进行拼接 是 抗药物A

【解析】

分析题图：含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位点，其中SmaⅠ酶的切割位点位于抗病基因（目的基因）上；质粒含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ的切割位点。所以要获得重组质粒，可以用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ对目的基因和质粒进行切割。

（1）限制酶切割的是DNA分子中特定的两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键。

（2）为了保证目的基因在受体细胞中能够成功表达（或转录），在构建图1中的重组质粒时，目的基因上游和下游必须连接有特定的启动子和终止子。

（3）根据以上分析已知，切割图示目的基因和质粒采用的限制酶都是PstⅠ和EcoRⅠ，这样才能使得质粒和目的基因的两端具有相同的粘性末端，便于二者进行正确的拼接。根据图2分析限制酶的识别序列和切割位点可知，单独用PstⅠ切割质粒后的片段为：。

（4）转基因技术的原理是基因重组，属于可遗传变异；根据题意分析，欲利用含药物A的培养基筛选已导入抗病基因（目的基因或重组质粒）的香蕉细胞，则重组质粒中应含有抗药物A基因作为标记基因。