Question

【题目】毛角蛋白Ⅱ型中间丝（KIFⅡ)基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。

(1)获取外源基因用到的工具酶是______________。

(2)在过程②中，用_______酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。把一个单细胞从群体中分离出来单独培养，使之繁衍成一个新的细胞群体的技术，叫细胞克隆。未经克隆化的细胞系具有_______性。由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞时需在培养基中加入一定量的________，在培养过程中应将培养瓶置于___________培养。

(3)若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行_______后进行胚胎移植。

(4)下列有关转基因山羊培育过程的叙述，错误的是_____________。

A.图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞

B.重组细胞最初分裂时开始进行DNA复制和基因的转录

C.将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位

D.如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应扩增该基因

Answer 1

【答案】 限制性核酸内切酶 胰蛋白酶 异质 动物血清 CO2培养箱 胚胎分割 B

【解析】试题分析：根据题意和图示分析可知：图示表示获得转KIFⅡ基因的高绒质绒山羊的简单流程图，其中①表示基因表达载体的构建过程，该过程需要限制酶和DNA连接酶；②表示动物细胞培养过程，该过程需要采用胰蛋白酶处理组织块以获得单个细胞；③表示卵母细胞的采集和培养过程；④表示核移植过程。

（1）获取外源基因需要用限制性核酸内切酶对含有该基因的DNA片段进行切割。

（2）②表示动物细胞培养过程，该过程中常用胰蛋白（或胶原蛋白）酶处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞；未经克隆化培养的细胞系可能是由多个能无限增殖的细胞增殖来的，不一定具有相同的性状，具有异质性；在培养细胞时需在培养基中加入一定量的动物血清，以补充合成培养基不含有的成分，在培养过程中应将培养瓶置于CO2培养箱培养，以维持pH的稳定。

（3）若要获得多只相同的转基因山羊，可对图中早期胚胎进行胚胎分割后进行胚胎移植。

（4） A、图中重组细胞的细胞核来自导入目的基因的细胞，A正确；重组细胞最初分裂时虽然复制了DNA，但基因转录并未开始，B错误；将早期胚胎（如早期囊胚）植入到代孕母羊的输卵管或子宫角部位，C正确；如果KIFⅡ基因的序列是已知的，则可用化学方法合成或用聚合酶链式反应（PCR）扩增该基因，D正确。