Question

目前人及动物用流行性感冒病毒疫苗的生产大多采用鸡胚．这种传统的方法劳动强度大，鸡胚用量大，需要繁琐的纯化工艺去除鸡胚蛋白减少过敏反应．流感的大流行性以及新发流感的流行迫切需要一种新的疫苗生产方法．如图是一种RNA流感病毒疫苗研制流程．请回答有关的问题：

（1）流感病毒疫苗的简要操作流程如下：图中步骤①所代表的过程是

 

；步骤③可用

 

处理大肠杆菌，使其处于

 

；检验S基因是否翻译成S蛋白的方法是

 

．
（2）如果要生产抗流感病毒的单克隆抗体，请你帮助完成制备单克隆抗体的主要步骤：
①用该流感病毒对小鼠进行注射，从产生免疫反应小鼠的脾脏中得到相应的B淋巴细胞；
②设法将鼠的

 

与B淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，得到

 

的杂交瘤细胞；
③对上述杂交瘤细胞，还需进行

 

和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；
④将杂交瘤细胞在体内或

 

培养，就可以从中提取出大量的能抗该流感病毒的单克隆抗体了．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,单克隆抗体的制备过程

专题：

分析：结合题意分析图解：图中步骤①由RNA→DNA，表示逆转录过程；步骤②表示基因表达载体的构建；步骤③表示目的基因导入受体细胞；步骤④表示目的基因的检测与鉴定．
分子水平上的检测的方法：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．
单克隆抗体制备过程图解：

解答： 解：（1）图中步骤①所代表的过程是逆转录；一般受体细胞为原核生物时，可用Ca²⁺处理受体细胞，由于Ca²⁺能使细胞壁的通透性增加，能够使受体细胞处于感受态细胞；检验S基因是否翻译成S蛋白的方法是抗原一抗体杂交技术．
（2）①用该流感病毒对小鼠进行注射，从产生免疫反应小鼠的脾脏中得到相应的B淋巴细胞；
②设法将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择性培养基进行筛选，得到迅速大量繁殖，产生专一的抗体的杂交瘤细胞；
③对上述杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞；
④将杂交瘤细胞在体内或体外培养，就可以从中提取出大量的能抗该流感病毒的单克隆抗体了．
故答案为：
（1）逆转录   Ca²⁺感受态细胞   抗原一抗体杂交实验
（2）②骨髓瘤细胞    迅速大量繁殖，产生专一的抗体   ③克隆化培养   ④体外

点评：本题难度不大，属于考纲中识记层次的要求，考查了基因工程中目的基因的获取方法、目的基因的导入、目的基因的检测以及单克隆抗体的制备过程等知识，要求考生具有一定的基础知识，并能构建一定的知识网络，将单克隆抗体制备的过程利用图解进行记忆．