Question

【题目】I以富含纤维素的作物秸秆为原料、利用微生物发酵生产乙醇，是现代化石能源的重要途径。科学家通过实验筛选出分解纤维素能力较强的菌株，实验流程如下。

请回答:

（1）样品最好取自于______的土壤。

（2）筛选过程中，可以采用______染色法进行鉴定，其中______的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。

（3）培养基b应为______（固体、液体）培养基。扩大培养后，可采用______的方法进行计数。

（4）得到的目的菌种，一般用______法进行固定，常用的多孔性载体有______（写出1种即可）。在工业生产中使用固定化菌种的优点是____________（写出2点即可）。

Ⅱ肿瘤细胞的蛋白PD-L1能够与T细胞的蛋白PD-1结合，抑制免疫系统对肿瘤的杀伤作用。某种靶向药物可以阻断上述结合过程，从而增强免疫系统对肿瘤的杀伤作用。下图是制备该药物的流程图：

请据图回答：

（1）以______作为抗原注入小鼠体内，发生免疫反应后，从小鼠体内的______（器官）中提取细胞a。

（2）细胞a与b能融合的原理是______，常用的诱导方法有______（写出2个即可）。经过诱导，两两融合的细胞有______类。

（3）细胞d的特点是：____________。可将细胞d通过______或______进行大规模培养。

（4）鉴定提取物中是否含有该靶向药物时，可取适量提取物，加入______，观察是否出现凝集沉淀。

Answer 1

【答案】富含纤维素 刚果红 透明圈直径越大 液体 显微镜直接计数 包埋 海藻酸钠 可以重复使用，减少投资（稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高） PD-L1（或蛋白PD-L1） 脾 细胞膜具有流动性 聚乙二醇、灭活的病毒、电激等 3 既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体 体外培养 注入小鼠腹腔 PD-L1（或蛋白PD-L1）

【解析】

I本题考查纤维素分解菌的分离和培养,要求考生识记分离分解纤维素的微生物的原理,掌握固定化术及优点,能结合所学的知识准确题；Ⅱ本题主要考查人体免疫系统在维持稳态中的作用以及单克隆抗体制备过程,意在考查学生对基础知识的理解掌握,难度适中。据图分析,细胞a是经过抗原免疫的B淋巴细胞,细胞b是骨髓瘤细胞,筛选1是通过筛选得到杂交瘤细胞c(去掉未杂交的细胞以及自身融合的细胞),筛选2是选出能够产生特异性抗体的细胞d,然后进行体外和体内培养,分离提取即可。

I (1)要筛选出分解纤维素能力较强的菌株,样品最好取自于富含纤维素的土壤。

(2)在培养基中加入刚果红,可与培养基中的纤维素形成红色复合物,当纤维素被分解后红色复合物不能形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈,从而可筛选纤维素分解菌,其中透明圈直径越大的菌落中的菌种分解纤维素能力较强。

(3)要扩大培养菌种,应该采用液体培养基。扩大培养后,可采用显微镜直接计数的方法进行计数。

(4)固定化细胞一般采用包埋法,常用的多孔性载体有海藻酸钠。在工业生产中使用固定化菌种的优点是:可以重复使用,减少投资、稳定性强、操作简便、发酵速度快、生产周期短、酒精得率高等。

Ⅱ(1)由图示可知,以PD-L1作为抗原注入小鼠体内,发生免疫反应后,从小鼠体内的脾脏中提取细胞a。

(2)细胞a与b能融合的原理是细胞膜具有流动性,常用的诱导方法有聚乙二醇、灭活的病毒、电激等。经过诱导,两两融合的细胞有3类,即瘤瘤细胞、BB细胞、杂交瘤细胞。

(3)细胞d的特点是:既能无限增殖,又能产生专一抗体。可将细胞d通过体外培养或注入小鼠腹腔进行大规模培养。

(4)鉴定提取物中是否含有该靶向药物时,可取适量提取物,加入PD-1,观察是否出现凝集沉淀,若出现凝集沉淀,则说明提取物中含有该靶向药物。