Question

【题目】酵母菌生长的最适宜温度在20～30℃之间，能在pH值为3～7.5的范围内生长，在氧气充足的环境中主要以出芽生殖的方式快速增殖．大约每1.5～2h增殖一代．某研究性学习小组据此探究酵母菌种群在不同条件下种群密度的动态变化，进行了如下实验，实验操作步骤如下：

第一步：配制无菌马铃薯葡萄糖培养液和活化酵母菌液．

第二步：利用相同多套装置，按下表步骤操作．

第三步：用血细胞计数板计数装置中起始酵母菌数目，做好记录．

第四步：将各装置放在其他条件相同且适宜的条件下培养．

第五步：连续7d，在不同时间取样计数，做好记录．

回答下列问题．

（1）改正实验操作步骤中的一处错误____________________________________．

（2）本实验的具体课题名称是______________________．

（3）某同学第5d在使用血细胞计数板计数时做法如下：

①振荡摇匀试管，取1mL培养液并适当稀释，稀释样液的无菌水中加入了几滴台盼蓝染液（台盼蓝是一种大分子染料），

②先将______________________放在计数室上，用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液________________________________________，制作好临时装片。若先将培养液滴在计数板上，再盖上盖玻片，则实验结果____________________（填偏大、偏小或不变）；若酵母菌未全部沉降到计数室底部，就观察计数，则实验结果_________________（填偏大、偏小或不变）。

③显微镜下观察计数：在观察计数时只统计__________________（被、不被）染成蓝色的酵母菌．

（4）已知血球计数板的大方格为1mm×1mm，若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1mm，计数时一个大方格观察值为M，则10mL培养液中酵母菌的总数约为____________个．

Answer 1

【答案】第五步中应每天同一时间（定时）取样 探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化 盖玻片 用滤纸（吸水纸）吸去 偏大 偏小 不被 M×106

【解析】

探究酵母菌种群数量的变化实验中，实验流程为：（1）酵母菌培养（液体培养基，无菌条件）→（2）振荡培养基（酵母菌均匀分布于培养基中）→（3）观察并计数→重复（2）、（3）步骤（每天计数酵母菌数量的时间要固定）→绘图分析。

（1）该实验中，每天应在同一时间取样，因此第五步中应在每天同一时间（定时）取样．
（2）分析实验表格可知，实验中自变量包括温度和无菌马铃薯葡萄糖培养液的浓度，因此抗原确定本实验的课题名称是探究酵母菌种群在不同的培养液浓度和温度条件下种群密度的动态变化。

（3）②将酵母菌滴加到血球计数板上时，应先将盖玻片放在计数室上，再用吸管吸取稀释后的培养液滴于其边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，制作好临时装片，若先将培养液滴在计数板上，再盖上盖玻片，则实验结果偏大。
③由于细胞膜具有选择透过性，因此不能被染成蓝色的酵母菌为活菌，所以显微镜下观察计数时，应只记不被染成蓝色的酵母菌。
（4）已知血球计数板的大方格为1mm×1mm，若盖玻片下经稀释10倍的培养液厚度为0.1mm，计数时一个大方格观察值为M，则10mL培养液中酵母菌的总数=一个大方格观察值÷1个大方格容积×稀释倍数×溶液体积=M÷（1mm×1mm×0.1mm×10-3）×10×10=M×106个。