Question

20．乳酸菌是泡菜制作中起主要作用的菌群，某科研小组从泡菜液中分离、筛选纯种乳酸菌，对其功能进行相关研究，为改进传统泡菜生产工艺提供技术参考．
（1）乳酸菌菌种的分离与纯化：取泡菜发酵汁进行梯度稀释（或系列梯度）操作，得到10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液．选择合适的稀释度样液加入10mL乳酸菌分离培养基（MRS培养基），凝固后再注入5mL水琼脂培养基，造成厌氧（需氧/厌氧）环境，37℃培养2～3天，根据菌落的形状、大小、隆起程度等特征，进行反复分离、纯化至纯菌种．整个操作过程需在无菌条件下进行．
（2）产强酸菌株的筛选：利用产酸菌在含CaCO₃的培养基上产生溶解圈的原理，将上述菌种接种到含CaCO₃的MRS培养基上，经过培养，挑选溶解圈较大的菌落，进一步纯化．
（3）产强酸菌株的功能研究，结果如图：人工接种乳酸菌有利于抑制（促进/抑制）亚硝酸盐的生成．泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、温度和食盐用量等．

Answer 1

分析 分析题图：人工接种和自然发酵相比，人工接种产生的亚硝酸盐少，说明人工接种乳酸菌有利于抑制亚硝酸盐的生成．

解答 解：（1）乳酸菌菌种的分离与纯化：取泡菜发酵汁进行梯度稀释（或系列梯度）操作，得到10¹、10²、10³、10⁴、10⁵、10⁶倍的稀释液．乳酸菌属于厌氧菌，所以培养乳酸菌时需要厌氧环境；分离、纯合菌种的操作过程需要在无菌条件下进行．
（2）产酸菌能在含CaCO₃的培养基上产生溶解圈，且产生的溶解圈越大，说明其产酸能力越强，因此要挑选溶解圈较大的菌落进行进一步纯化．
（3）根据曲线图中结果可知，人工接种乳酸菌有利于抑制亚硝酸盐的生成．泡菜制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素还有时间、温度和食盐用量等．
故答案为：
（1）梯度稀释（或系列梯度）   厌氧       菌落    无菌
（2）溶解圈较大
（3）抑制    温度    食盐用量

点评 本题结合曲线图，考查泡菜的制作、微生物的分离和培养等知识，要求考生识记参与泡菜制作的微生物及其代谢类型；识记微生物分离和培养的过程，采用的接种方法等，能结合所学的知识准确答题．